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技術(shù)文章

富集對(duì)水中痕量有機(jī)污染物進(jìn)行高靈敏度液質(zhì)聯(lián)用定量分析

閱讀:919          發(fā)布時(shí)間:2022-7-26

前言如今在水中可發(fā)現(xiàn)過去從未檢測(cè)到的化學(xué)品,或者檢測(cè)到的水平與預(yù)期可能存在顯著差異[1]。由于這些物質(zhì)的存在、出現(xiàn)頻率以及來源對(duì)人類健康和環(huán)境造成的風(fēng)險(xiǎn)尚不明確,因此通常稱這些物質(zhì)為引發(fā)關(guān)注的新型污染物 (CEC)。本實(shí)驗(yàn)在水中檢測(cè)到多種痕量有機(jī)物的混合物,其中某些有機(jī)物的濃度達(dá)到 ng/L(萬億分之一,ppt)時(shí)即會(huì)影響水生生物。已知一部分 CEC 是內(nèi)分泌干擾物,而另外一部分則會(huì)影響糖皮質(zhì)激素活性,長期暴露在低劑量 CEC 之下所帶來的協(xié)同效應(yīng)尚不明確。因此,EPA 制定了非受控污染物監(jiān)控法規(guī)(UCMR) 用于評(píng)估水源中 CEC 的潛在威脅。新的 UCMR3 需要監(jiān)控 2013 到 2015 年內(nèi)的 30 種污染物。國家、實(shí)驗(yàn)室、公共給水系統(tǒng)都將參與評(píng)估監(jiān)控、篩檢調(diào)查和預(yù)篩選測(cè)試過程 [2]。

 

監(jiān)控水源中痕量污染物的難度之一在于,檢測(cè)需要充足的樣品量并經(jīng)過充分的樣品前處理才能完成。傳統(tǒng)分析方法在實(shí)施儀器分析之前通常需要使用 1 L 水樣,并對(duì)水樣進(jìn)行固相萃取,達(dá)到合適的萃取濃度。這些方法需要輸送大量樣品、花費(fèi)大量的人力以及大量有機(jī)溶劑。本應(yīng)用簡報(bào)描述了一種在線 SPE 痕量富集方法,該方法只需要極少的樣品前處理,可顯著減少所需的樣品量。該方法能夠穩(wěn)定且靈敏地檢出 ng/L 級(jí)痕量有機(jī)污染物。該 UHPLC/MS/MS 方法使用可重復(fù)利用的聚合物固相萃取柱,該固相萃取柱在線連接到Agilent 1290 Infinity 液相色譜系統(tǒng)上,而此系統(tǒng)將與 Agilent 6460LC/MS 三重四極桿系統(tǒng)聯(lián)用。系統(tǒng)將同時(shí)使用正/負(fù)電噴霧離子源 (ESI),能夠節(jié)省大量時(shí)間。多反應(yīng)監(jiān)測(cè) (MRM) 能夠使 24 種有機(jī)污染物的 MRL 降至 0.10 ppt,且不高于 15 ppt。大部分有機(jī)物的回收率可與傳統(tǒng)萃取技術(shù)相媲美,范圍在 70% 至 130%,并且大部分化合物的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于 10%。該方法非常穩(wěn)定,已用于監(jiān)測(cè)污水處理過程(從入水到氯化流出物)中這些污染物的含量。

 

實(shí)驗(yàn)部分標(biāo)樣和試劑除兩種校準(zhǔn)標(biāo)樣以外,其他試劑(最高純度)均購自 SigmaAldrich 公司。眠爾通購自 Cerilliant 公司,三氯生購自 Alfa Aesar公司。校準(zhǔn)標(biāo)樣溶液的制備:首先將固體純品溶于甲醇,制備濃度為 500 µg/mL 的各種標(biāo)樣儲(chǔ)備液。然后制備含所有目標(biāo)分析物(5 µg/mL) 的混合樣。用 HPLC 級(jí)純水稀釋該儲(chǔ)備液制成繪制校準(zhǔn)曲線所需的濃度。

標(biāo)記的替代內(nèi)標(biāo)物除 13C4-全氟辛酸和 13C4-全氟辛烷磺酸鹽購自Wellington 實(shí)驗(yàn)室;撲米酮-d5 購自 Toronto Research Chemicals;吉非羅齊-d6 購自 C/D/N Isotopes 以外,其他均購自劍橋同位素實(shí)驗(yàn)室(見表 1)。使用的所有溶劑均達(dá)到*高純度,適用于液相色譜/質(zhì)譜分析。農(nóng)藥級(jí)甲醇和乙腈購自 Burdick & Jackson,而HPLC 級(jí)純水則購自飛世爾公司。

33.png

儀器系統(tǒng)將 Agilent 1200 Infinity 液相色譜系統(tǒng)模塊與 Agilent 6460A三重四極桿液/質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)進(jìn)行聯(lián)用。在線富集系統(tǒng)使用 Agilent1200 系列四元泵、配用 900 µL 計(jì)量器和多次抽取功能的 Agilent1200 自動(dòng)進(jìn)樣器、可編程六通選擇閥(閥 1)、12 通/2 位小柱選擇閥(閥 2)以及 Agilent 1290 Infinity 液相色譜,如圖 1 所示。

……

結(jié)果與討論在線 SPE 操作流程將水樣(不含顆粒物)裝入自動(dòng)進(jìn)樣器的 2 mL 棕色玻璃瓶中。將樣品(體積 1.5 mL)注入可重復(fù)利用的聚合物富集柱,該富集柱連接到輸出 12 通/2 位色譜柱選擇閥(頂閥,2 號(hào)閥,見圖 2A)。總共可連接六根不同的小柱。水洗脫液導(dǎo)入廢液瓶(見圖 2A)。通常,大約 3 min 后完成上樣。然后將底閥(1號(hào)閥)切換至洗脫位置(見圖 2B),在高壓梯度泵上啟動(dòng)洗脫梯度。將捕集的分析物脫附到 Agilent Poroshell 120 EC 分析柱上,然后執(zhí)行 LC/MS/MS 分析。然后使用溶劑 B(乙腈/異丙醇/甲醇)(1:1:1,見圖 2B)清洗小柱。在分析運(yùn)行過程中,隨著 1 號(hào)閥返回至上樣位置(圖 2A),可根據(jù)需要在四元上樣泵中使用溶劑 B進(jìn)一步清洗富集柱,然后將溶劑條件恢復(fù)為*溶劑 A(水 +0.1% 乙酸),準(zhǔn)備分析下一個(gè)樣品。對(duì)于污水樣品,每根可重復(fù)利用的 SPE 柱通常可執(zhí)行至少 100 次進(jìn)樣。然后可以將 12 通閥(2 號(hào)閥,見圖 2)切換至下一根小柱,用于下一進(jìn)樣序列。

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