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前言：通常以陽離子交換固相萃取 (SPE) 法對含有堿性藥物成分的生物樣品進(jìn)行制備。研究人員也一直在尋找更為簡便的樣品處理方法以提高生物分析的通量。Agilent VersaPlateSLE 多孔板是應(yīng)對大量樣品的理想解決方案，因?yàn)槠浔苊饬?SPE 方法中許多常規(guī)的必須步驟，例如調(diào)節(jié)、平衡和沖洗步驟。本應(yīng)用簡報選擇人類血漿作為生物樣品基質(zhì)。并使用 VersaPlate SLE 作為實(shí)際實(shí)驗(yàn)室方案，通過精確度和準(zhǔn)確度數(shù)據(jù)展示了其性能和適用性。

材料與方法甲醇為 LC/MS 級。將 1 mL 甲酸加入 1 L 甲醇中制備含有 0.1%甲酸的甲醇溶液；將 1 mL 甲酸加入 1 L 水中制備含有 0.1% 甲酸的水溶液。下文列出了采用 Agilent VersaPlate SLE 分離 b 阻斷劑的樣品制備程序。1. 用 2% 氨水 1: 1 稀釋加標(biāo)后的血漿2. 將 0.3 mL 加標(biāo)稀釋后的血漿加載到 VersaPlate 中3. 應(yīng)用微真空使樣品開始流動，直至所有樣品被吸附劑所浸潤，然后停止真空4. 等待 5 分鐘，待樣品吸附5. 在微真空條件下，用 0.9 mL 乙酸乙酯洗脫兩次6. 蒸干并復(fù)溶于 0.15 mL 初始流動相中

條件色譜柱： Agilent ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl 色譜柱，2.1 x 100 mm，3.5 µm（部件號 959793-912）樣品制備： Agilent VersaPlate 預(yù)裝 96 孔板，含 Hydromatrix 和ChemElut，260 mg（部件號 75430260）樣品： 參見表 1洗脫液： A，0.1% 甲酸B，甲醇 + 0.1% 甲酸進(jìn)樣量： 3 µL流速： 0.6 mL/min梯度： 時間 (min) % B0 302 303.5 804.5 804.6 307 30LC/MS/MS: Agilent 1290 Infinity LC液相色譜 與 Agilent 6460 三重四級桿 LC/MS聯(lián)用系統(tǒng)干燥氣： 300 °C, 7 L/min鞘氣： 325 °C, 8 L/min霧化器壓力： 45 psi毛細(xì)管： 3,500 V（正）噴嘴電壓： 0 V

結(jié)果與討論所有化合物均通過 Eclipse Plus Phenyl-Hexyl 色譜柱實(shí)現(xiàn)了很好的色譜分離（圖 1）。在 0.1 至 100 ng/mL 的整個校正范圍內(nèi)，得到了線性 (R2 ? 0.995) 的校正曲線（圖 2）。

低、中、高濃度下的回收率在 81.6 至 105.8% 之間（每個濃度下n=8）。此外，該研究的 %RSD 較低（約為 4.5%），表明精確度和重現(xiàn)性良好，也進(jìn)一步證明了 SLE 多孔板的適用性（表 2）。

結(jié)論對于樣品量較小，同時樣品數(shù)量很大的人類血漿樣品，AgilentVersaPlate 形式的 SLE 可實(shí)現(xiàn)操作。不同于常規(guī)的 SPE 樣品制備方法，SLE 無需進(jìn)行調(diào)節(jié)、平衡或沖洗步驟。由于是采取液液萃取的方式，但無需特殊的玻璃器皿或重復(fù)的萃取步驟，只需在 VersaPlate 形式的 SLE 中進(jìn)行簡單的過濾，固相支持的液液萃取已成為獲取可重復(fù)性數(shù)據(jù)的方法。