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前言：唾液因?yàn)槠淙菀撰@取，難以摻偽，技術(shù)改進(jìn)可以進(jìn)行更廣泛的藥物篩查而越來越廣泛地被作為藥物測試基質(zhì)使用。唾液分析用于工作場所藥物檢測、刑事司法、路邊樣品采集、事故后處理、“追因"檢查和疼痛管理計(jì)劃等方面。唾液中藥物定量的主要問題之一是較難收集足夠體積的樣本量以便對更多的化合物進(jìn)行可靠的確認(rèn)。很多裝置都不能給出唾液收集的體積，因此，如果沒有實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步的處理，任何定量結(jié)果都毫無意義。此外，配備收集墊或材料用于唾液收集的裝置在分析之前不能給出每種藥物能從墊上回收的量，這也使定量成為一難題。本文提到的分析方法使用 Quantisal™ 唾液收集器（Immunalysis 公司，如下所示），可以采集已知體積的純唾液量。對很多藥物從收集襯墊回收至轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液中的回收率進(jìn)行了評估，結(jié)果列于下圖。

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用于 LC/MS/MS 確認(rèn)和定量的樣品前處理鑒定過程包括向唾液樣品中添加氘代內(nèi)標(biāo)、用緩沖液處理、固相萃取 (SPE)，以及使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 (LC/MS/MS) 進(jìn)行分析。堿性藥物（這里適用于除肌安寧和眠爾通以外的所有藥物）SPE 色譜柱：Plexa PCX（部件號 12108601，60 mg/1 mL 或部件號 12108603，60 mg/3 mL）

1.量取一份 (1 mL) 唾液樣品：Quantisal 緩沖液混合物（相當(dāng)于 0.25 mL 純唾液）

2. 向樣品中加入適量內(nèi)標(biāo)和 0.1 M 磷酸鉀緩沖液（pH 6.0；1 mL）

3. 活化：甲醇 (0.5 mL)

4. 上樣；不要使柱子*干燥

5. 淋洗：2% 甲酸 (1 mL)；甲醇 (1 mL)

6. 通氮?dú)獯蹈芍?(5 min)

7. 洗脫：乙酸乙酯：氫氧化銨（98:2，v/v；2 mL）

8. 蒸發(fā)至干；用流動相重新溶解 (50 µL)酸性藥物SPE 色譜柱：Plexa（部件號 12109301，30 mg/1 mL 或部件號 12109303，30 mg/3 mL）1. 量取一份 (1 mL) 唾液樣品：Quantisal 緩沖液混合物（相當(dāng)于 0.25 mL 純唾液）2. 向樣品中加入適量內(nèi)標(biāo)和醋酸（pH 4.0；1 mL）3. 活化：甲醇 (0.5 mL)；0.1 M 醋酸 (0.1 mL)4. 上樣；不要使柱子*干燥5. 淋洗：去離子水:醋酸（80:20，v/v；1 mL）；去離子水:甲醇（40:60，v/v；1 mL）7. 通氮?dú)獯蹈芍?(5 min)8. 洗脫：己烷:醋酸（98:2，v/v；1 mL）9. 蒸發(fā)至干；用流動相重新溶解 (50 µL)肌安寧和眠爾通SPE 色譜柱：Plexa（部件號 12109301，30 mg/1 mL 或部件號 12109303，30 mg/3 mL）1. 量取一份 (1 mL) 唾液樣品：Quantisal 緩沖液混合物（相當(dāng)于 0.25 mL 純唾液）2. 向樣品中加入適量內(nèi)標(biāo)和 0.1 M 磷酸鉀緩沖液（pH 6.0；1 mL）3. 活化：甲醇 (2 mL)，0.1 M 磷酸鉀緩沖液（pH 6.0；2 mL）4. 上樣；不要使柱子*干燥5. 淋洗：去離子水 (2 mL)；甲醇:去離子水 25:75 v/v (1 mL)6. 通氮?dú)獯蹈芍樱?0 psi，5 min）7. 淋洗：己烷 (1 mL)8. 真空下干燥柱子 (5 min)9. 洗脫：乙酸乙酯:己烷 50:50 v/v (3 mL)10. 蒸發(fā)至干；用流動相重新溶解 (50 µL)

LC/MS/MS 儀器本文介紹的檢測均在下列儀器上進(jìn)行：Agilent 1200 系列 UHPLC，包括：G1379B 微量真空脫氣機(jī)G1312B SL (600 bar) 二元泵，配備溶劑選擇閥；標(biāo)準(zhǔn)延遲體積配置G1367D 多孔板進(jìn)樣器，在針座和進(jìn)樣閥間配有 0.2 µm 在線過濾器（部件號 5067-1553）G1316B 恒溫柱箱，帶 6 通柱切換閥Agilent 6430A 三重四極桿 LC/MS/MS 系統(tǒng)，配置安捷倫正交 ESI 電離源。除非另有說明用于特定的化合物，否則離子化模式采用陽離子模式。