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技術(shù)文章

LC/MS/MS液質(zhì)聯(lián)用儀測定牛肉中的氨苯砜

閱讀:660          發(fā)布時間:2022-3-22


前言:本文使用簡單易用的 Agilent Bond Elut Plexa PCX 固相萃取技術(shù)對牛肉樣品進行前處理,然后采用結(jié)合 Agilent 6460 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)的 Agilent Poroshell 120 液相色譜柱進行高效分離和高靈敏度檢測,實現(xiàn) ppb 級濃度的氨苯砜分析。

樣品前處理首先對樣品進行預處理,稱取 2 g 磨碎的牛肉置于 50 mL 離心管,添加 10 mL 乙腈。將離心管強力渦旋 2 min。試管中加入正己烷(5 mL),渦旋 1 min。然后,將試管在 4 °C 下以 5000 rpm 的速度離心 5 min。丟棄所有上清液。將乙腈層轉(zhuǎn)移至另一試管,添加10 mL 濃度為1 M 的鹽酸水溶液。然后將試管渦旋 1 min,用于固相萃取。圖 1為樣品提取步驟。先后采用 3 mL甲醇和 3 mL水預處理 AgilentBond Elut Plexa PCX 小柱(60 mg,3 mL,部件號 12108603)。提取物(相當于 2 g 樣品)以 1 mL/min 的速度通過小柱。當樣品全部通過小柱后,用 5 mL 0.1 mol/L 鹽酸水溶液和 5 mL 甲醇淋洗小柱。小柱在負壓(低于 2.0 kPa)下干燥 5 min。使用 5 mL25% 氫氧化銨的乙腈溶液對樣品進行洗脫。收集洗脫液并在 40 °C以下使用氮氣吹干。用 15 % 甲醇水溶液 (v:v) 溶解樣品殘渣并定容到 1.0 mL,經(jīng) 0.2 µm 濾膜過濾,然后采用 LC/MS/MS 進行分析。

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結(jié)果與討論:

線性和檢測限將混合工作溶液加標至空白基質(zhì)中,制得用于創(chuàng)建外標校準曲線的溶液(0.25 µg/kg、0.5 µg/kg、1 µg/kg、2 µg/kg 和 5 µg/kg)。牛肉經(jīng)過整個流程(包括預處理和 SPE 步驟),得到空白基質(zhì)。將各種化合物信噪比高于 3:1 時的濃度作為檢測限 (LOD)。校準曲線和 LOD 的結(jié)果列在表 2 中。

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回收率與重現(xiàn)性測定高低不同濃度級別氨苯砜的回收率(表 3)。通過比較 SPE提取前加標樣品的 MRM 峰面積和 SPE 提取后的加標樣品(后加標)MRM 峰面積計算回收率。圖 2 所示為低濃度氨苯砜加標于空白牛肉樣品分析所得的色譜圖。圖 3 為空白樣品。

 

 

 

結(jié)論:使用 Agilent Bond Elut Plexa PCX SPE 分析牛肉中的氨苯砜具有良好的回收率和重現(xiàn)性。Bond Elut Plexa SPE 聯(lián)用 LC/MS/MS分析,可實現(xiàn)肉類樣品中 ppb 級濃度以下氨苯砜的高靈敏度定量分析。

 

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