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色譜流動相的制備： 1 M 甲酸銨溶液：溶解63 g甲酸銨于1 L HPLC級的水中。 流動相A：在1 L HPLC級的水中，加入2 mL甲酸和2 mL 1 M甲酸銨溶液。 流動相B：在100 mL HPLC級的水中，加入2 mL甲酸和2 mL 1 M甲酸銨溶液，用HPLC級的乙腈稀 釋到1 L。

 

 

樣品制備 基于Hartig等人提出的方法[1]： 每次稱量兩份等重的樣品，其中一份加入標準染料。以往的經(jīng)驗告訴我們，每種基質(zhì)對MS/MS靈敏 度的影響非常大，并且有時相同基質(zhì)的不同樣品之間的基質(zhì)效應(yīng)影響差別也很大。 1. 稱量兩份等量的勻質(zhì)樣品； 2. 一份溶液中加入標準品溶液； 3. 用乙腈對每個樣品進行提取； 4. 加提取劑到的體積； 5. 過濾； 6. LC-MS/MS分析

 

基于Schreiber等人提出的方法[2]： 1. 稱量1 g勻質(zhì)后的樣品； 2. 加入20 µL內(nèi)標溶液 (1 µg/mL)； 3. 如果采用標準加入法分析，則需要加入標準溶液； 4. 加入10 mL 乙腈； 5. 振搖10 min； 6. 加入10 mL水； 7. 離心或過濾。

 

 

色譜分離條件 Agilent 1100 系統(tǒng)： G1312A二元泵系統(tǒng)、G1367A型自動進樣器、柱溫箱。 色譜柱： Phenomenex LUNA，5 µm，C8，150 mm×2 mm。 流動相：A相—水 + 2 mM 甲酸銨 + 0.2%甲酸；B相—水 / 乙腈 (10 / 90) + 2 mM 甲酸銨 + 0.2%甲酸。

MS/MS 檢測 API 3200™ 和3200 QTRAP® LC-MS/MS液質(zhì)系統(tǒng)。TurboIonSpray® 離子源，正離子模式，MRM掃描 方式。