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戴安離子色譜針對巴膽堿注射液含量及有關(guān)物質(zhì)測定
閱讀：460 發(fā)布時(shí)間：2019-8-26關(guān)鍵詞：離子色譜；電導(dǎo)；IonPac CS17；卡巴膽堿注射液；含量測定；有 關(guān)物質(zhì)
引言
卡巴膽堿為M、N膽堿受體激動(dòng)藥，是人工合成的擬膽堿藥，具有雙重縮 瞳作用，可直接作用瞳孔括約肌上的膽堿受體，即刻產(chǎn)生縮瞳效果; 同時(shí)有抗 膽堿酯酶作用，能維持長時(shí)間的縮瞳效果。 [1]
卡巴膽堿注射液為中國藥典收載品種，目前使用的含量測定方法為紫外 分光光度法，該方法需對卡巴膽堿衍生后才能測定，操作繁瑣，易引入誤 差。[2]本實(shí)驗(yàn)使用離子色譜法對卡巴膽堿進(jìn)行測定，靈敏度高，重現(xiàn)性好，且 該色譜條件可同時(shí)分離測定卡巴膽堿注射液中含有的雜質(zhì)膽堿和乙酰膽堿。
測試條件
儀器：戴安ICS 5000離子色譜系統(tǒng)； 分析柱：IonPac CS17，7.0 µm，250×4 mm （P/N: 060557）； 保護(hù)柱：IonPac CG17，7.0 µm，50×4 mm （P/N: 060560）； 柱溫：30 ℃； 淋洗液：5 mmol/L甲烷磺酸（MSA） 流速：1.00 mL/min； 定量環(huán)：20 µL 抑制器：CSRS 300 4 mm，自循環(huán)模式抑制
檢測方式：抑制型電導(dǎo)檢測，陽離子自動(dòng)電解連續(xù)再 生微膜抑制器CSRS 300 4 mm（P/N: 064556），自循環(huán) 模式，抑制電流15 mA。
樣品前處理
取注射液直接進(jìn)樣。
結(jié)果和討論
重現(xiàn)性、線性和靈敏度
取含卡巴膽堿100 mg/L、氯化膽堿和乙酰膽堿分別 為10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積、保留時(shí) 間、峰高的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均低于3%。結(jié)果見 表1。
在本色譜條件下配制適宜濃度范圍的離子標(biāo)準(zhǔn)曲線， 卡巴膽堿在20~200 mg/L范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系，其線 性相關(guān)系數(shù)r=0.9999；膽堿在2~20 mg/L范圍內(nèi)具有良好 的線性關(guān)系，其線性相關(guān)系數(shù)分別為r=0.9999；氯化膽堿 在2~20 mg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，其線性相關(guān)系 數(shù)分別為r=0.9999。在本實(shí)驗(yàn)條件下，氯化膽堿的檢出限 為5.6 µg/L，卡巴膽堿的檢出限為9.7 µg/L，乙酰膽堿的檢 出限為14.0 µg/L。
實(shí)際樣品分析及加標(biāo)回收
取注射液10 mL，加入含卡巴膽堿100 mg/L、氯化膽 堿和乙酰膽堿分別為10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，混合，進(jìn)行加 標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，三種離子加標(biāo)回收率均在90~101%之間。 色譜圖如圖1所示。
結(jié)論
三種膽堿類化合物在本實(shí)驗(yàn)條件下，可以被很好的 分離和測定。此方法不需衍生，操作簡單，且方法有很 好的特異性和重現(xiàn)性，結(jié)果可靠，可用于卡巴膽堿注射 液含量與有關(guān)物質(zhì)的同時(shí)檢測。