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技術(shù)文章

安捷倫液質(zhì)聯(lián)用儀蜂蜜中氨基糖苷類抗生素檢測

閱讀:951          發(fā)布時間:2019-7-22

蜂農(nóng)不合理使用氨基糖苷類抗生素 蓄積殘留危害人體健康

氨基糖苷類抗生素是一種廣泛應(yīng)用于動物養(yǎng)殖的抗生素,該類化合物該類抗生素對多種革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌有抗菌效果,是我國畜牧業(yè)、農(nóng)業(yè)和水產(chǎn)業(yè)常用的獸藥之一,也常被添加到飼料中促進(jìn)動物生長發(fā)育。用于獸藥的品種主要有鏈霉素、雙氫鏈霉素、新霉素、卡那霉素、壯觀霉素、慶大霉素潮霉素、安普霉素等。嬰兒對氨基糖苷類藥物敏感,AGs 能透過胎盤損傷胎盤聽覺。長期使用易產(chǎn)生耐藥性并且對耳及腎臟有嚴(yán)重危害。雖然這類抗生素在春季收蜜期間并不多見,但我國蜂農(nóng)習(xí)慣于在夏季使用該類抗生素。歐美等國家規(guī)定食品中的氨基糖苷類抗生素的大殘留*(MRLs)大多不超過 100μg·kg-1 。

建立蜂產(chǎn)品中的氨基糖苷類藥物的分析檢測方法對蜂產(chǎn)品的質(zhì)量安全具有很重要的保障和監(jiān)測意義。使用固相萃取結(jié)合 LC-MS/MS 同時分析蜂蜜和蜂王漿中殘留的8種氨基糖苷類抗生素的方法。

 

如何檢測氨基糖苷類抗生素?

安捷倫應(yīng)用支持團隊與中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所用戶合作開發(fā)了基于固相萃取與 安捷倫LC-MS/MS 同時分析蜂蜜和蜂王漿中殘留的 8 種氨基糖苷類抗生素的方法。該方法采用磷酸鹽緩沖溶液提取樣品,經(jīng) Nexus WCX 和 Plexa PCX 分別針對不同的目標(biāo)分析物萃取凈化后進(jìn)行 LC-MS/MS 分析。評價了 Bond Elut Plexa PCX 和 Bond Elut Nexus WCX 對 8 種不同氨基糖苷類藥物的吸附和保留情況,發(fā)現(xiàn)大多數(shù)氨基糖苷類藥物在兩種SPE柱中均具有很好的保留和洗脫性能,僅有鏈霉素和雙氫鏈霉素在 PCX柱上保留太強較難洗脫,而在 WCX 上卻可以有很好的保留和洗脫性能。因此方法配合使用兩種 SPE 柱來完成對 8 種氨基糖苷類藥物的分析。



圖 1. 本實驗固相萃取操作流程

                                           

方法的線性范圍為 10ng/mL~1µg/mL,兩種蜂產(chǎn)品基質(zhì)中三個添加水平下的濃度平均回收率分別為 76.42%~108.95% 和 74.61~113.70%,RSD 均小于 10%,方法的定量限為 15~35µg/Kg,檢測限為 5~12.5µg/Kg。


表 1. 蜂蜜中樣品中方法確認(rèn)結(jié)果(n=3) 




圖 2. 25ng/ml 8 種氨基糖苷類抗生素標(biāo)品的 MRM 譜圖

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