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技術文章

賽默飛氣相色譜針對奶粉中香蘭素和乙基香蘭素的測定

閱讀:673          發(fā)布時間:2019-7-16

摘要
以二氯甲烷為溶劑,提取奶粉中的香蘭素和乙基香蘭素,經(jīng)分散固相萃 取方法凈化后,用Trace1310氣相色譜儀測定,外標法定量,線性良好,回收 率和重現(xiàn)性均滿足分析要求。

 

 

引言
香蘭素(vanillin),又叫香草醛,學名3-甲氧基-4-羥基ben甲醛;乙基 香蘭素(ethyl vanillin),學名3-乙氧基-4-羥基ben甲醛。兩者均為白色或微 黃色結(jié)晶粉末,微溶于水,具有香莢蘭香氣及濃郁的奶香,是重要的食品添 加劑,廣泛用作食品、飲料以及日化用品等的增香劑。但是,大劑量使用香 蘭素等香料將有害健康。根據(jù)《食品安全國家標準食品添加劑使用規(guī)定》 GB2760-2011要求,凡使用范圍涵蓋0至6個月嬰幼兒配方食品不得添加任何 食用香料。2012年7月有報道稱,幾大洋品牌的I段奶粉被檢出添加了國家禁 止的香蘭素,因此需要建立相關檢測方法對奶粉中的香蘭素進行檢測。
目前關于香蘭素和乙基香蘭素的測定方法主要有分光光度法、電化學 法、液相色譜法、氣相色譜和氣質(zhì)聯(lián)用法,由于HPLC法對樣品凈化程度 要求不高,因此樣品預處理方面的研究較少。本方法采用二氯甲烷提取,分 散固相萃取凈化,建立同時測定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素含量 的氣相色譜法。

 

 

實驗部分
主要儀器設備與試劑
儀器:氣相色譜儀,Trace 1310,美國ThermoFisher。
試劑:二氯甲烷,色譜純;氯化鈉,分析純; Cleanert C18固體吸附劑;香蘭素和乙基香蘭素標準品。
樣品前處理方法
稱取5 g奶粉(到0.01 g)于100 mL容量瓶中, 加入20 mL水,振蕩,使成為均勻奶液,加水定容至刻 度,搖勻。用移液管移取5 mL奶液于15 mL離心管中,加 入2 g NaCl,5 mL二氯甲烷,蓋好蓋子振蕩提取5 min,靜 置2 min,然后以10000 rpm離心5 min,小心全部移取下 層有機層,過無水硫酸鈉后,定容至5 mL,加入150 mg C18吸附劑,渦旋1 min,靜置后吸取上層清液過0.2 µm濾 膜,待氣相色譜儀測定。

 

樣品的測定
上述得到的樣品溶液直接進樣,氣相色譜儀檢測,外 標法定量。儀器參數(shù)設置見表1. 

結(jié)果與討論   
標準樣品的色譜圖和線性
標準樣品中香蘭素和乙基香蘭素的色譜圖如圖1 所示。用標準樣品配制成濃度分別為1 µg/mL, 2.5 µg/ mL,10 µg/mL, 35 µg/mL, 50 µg/mL的系列標準工作液, 進樣1 µL,然后按照以上所述的測定方法進行GC-FID測 定,以標準物質(zhì)的濃度為橫坐標,以各標準物質(zhì)的峰面積 為縱坐標,繪制標準曲線,得到香蘭素和乙基香蘭素的標 準工作曲線如圖2。香蘭素和乙基香蘭素的相關系數(shù)分別 為0.9980和0.9991。

 

方法的精密度和回收率
對香蘭素和乙基香蘭素的1 µg/mL,2 µg/mL,10 µg/ mL三個水平加標樣品分別進行了3次測定,平均回收 率和相對標準偏差列于表2中。樣品加標的色譜圖見圖 3。選擇1 µg/mL的標準溶液,以噪聲的3倍計算,本方 法中香蘭素和乙基香蘭素的檢測限分別為0.33 µg/mL和 0.25 µg/mL。

 

對市售4個奶粉樣品中香蘭素和乙基香蘭素的測定
按上述前處理方法測定了4個奶粉樣品中的香蘭素 和乙基香蘭素含量,其中樣品1為I段奶粉,為禁止添加 香蘭素和乙基香蘭素。樣品2、3、4為III段奶粉,可以添 加香蘭素和乙基香蘭素,允許添加量為5 mg/100 mL, 即50 µg/mL。其中100 mL以即食食品計,即沖調(diào)好的 奶液,按照奶粉沖調(diào)說明一般為每100 mL水加入14 g奶 粉。樣品中的香蘭素和乙基香蘭素的含量采用外標法定 量,配制一系列標準工作溶液,以濃度為橫坐標,峰面 積為縱坐標繪制標準曲線,定量結(jié)果按公式(1)換算為 奶液中的含量,列于表3中。
C=Ci×Vi×14 g Ms×100 mL 

其中:C 為按照沖調(diào)說明沖調(diào)好的奶液中的含量, 單位為 µg/mL Ci 為經(jīng)前處理后終定容液中的含量,單位 為 µg/mL  Vi 為前處理后終定容液的體積,單位為mL Ms 為終定容液中包含的奶粉的質(zhì)量,單位 為g,本方法中為0.25 g

 

 

結(jié)論
建立了嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素的氣 相色譜測定方法。本方法步驟簡單、快捷,精密度高, 具有較好的分離度,雜質(zhì)干擾少,測定結(jié)果準確可靠, 靈敏度高,是測定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素、乙基香蘭 素的較好的方法。

 

 

 

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