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基因毒性物質(zhì)的排查和有效控制已成為藥物安全的一項重要研究課題
閱讀：1024 發(fā)布時間：2019-6-15就讓我們以 N,N-二甲基-3-氯丙胺鹽酸鹽中基因毒性雜質(zhì) 1,3-溴氯丙烷的檢測為典型案例，了解下華海制藥如何采用 Agilent Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)配備單四極桿質(zhì)譜檢測器（ Intuvo GC/MSD ）攻克基因毒性物質(zhì)檢測這一難題。
華海藥業(yè)，創(chuàng)立于 1989 年，總部位于中國浙江，業(yè)務(wù)覆蓋化學(xué)藥、生物藥、醫(yī)藥包裝、貿(mào)易流通等多個領(lǐng)域，與500多家制藥企業(yè)建立了長期合作關(guān)系，為近 200 個國家和地區(qū)提供醫(yī)療健康產(chǎn)品。自創(chuàng)立以來，華海制藥人一直堅守著“確保每一顆藥片都是‘安全’，確保每一顆膠囊都是‘可靠’！”的承諾。在有效控制基因毒性物質(zhì)方面，以王春華為代表的華海制藥人也從未退縮，一直在研究道路上不斷探索、創(chuàng)新、砥礪前行。
圖 1. 王春華等華海制藥工作人員合影
基因毒性雜質(zhì) 1,3-溴氯丙烷的傳統(tǒng)分析方法是采用 GC-FID 進行檢測，但該方法實驗操作繁瑣，重復(fù)性較差，且樣品基質(zhì)對 1,3-溴氯丙烷的檢測有干擾，使得 1,3-溴氯丙烷的含量檢測不準確，以至于無法真實體現(xiàn)出樣品的質(zhì)量。
但這點困難可難不倒華海制藥人，在安捷倫儀器的助力下，王春華及他的團隊現(xiàn)已成功自主開發(fā)出了新的雜質(zhì) 1,3-溴氯丙烷排查分析方法，并有效應(yīng)用于監(jiān)控產(chǎn)品質(zhì)量。此方法采用 Agilent Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)配備5977B單四極桿質(zhì)譜檢測器（ Intuvo GC/MSD ）對基因毒性雜質(zhì) 1,3-溴氯丙烷進行檢測，目標物峰形良好、可有效與樣品中的雜質(zhì)進行分離，并得到準確的測定結(jié)果。
表 1. 目標化合物的結(jié)構(gòu)式 
為了進一步確認該方法的有效性和可行性，對該方法在實驗室的適用性進行了驗證：
1. 建立分析條件
經(jīng)過不斷實驗和調(diào)整，獲得了 Intuvo GC/MSD 色譜條件，這是由 Intuvo GC/MSD 檢測基因毒素物質(zhì)的新方法。
系統(tǒng)信息: Agilent Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng) + 5977B 單四極桿氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng) + 7650A 自動液體進樣器 + HSS7697A 頂空進樣器
系統(tǒng)優(yōu)勢: 同一個序列可同時進行液體進樣和頂空進樣，無需任何硬件更改或調(diào)整
方法總評: 與其它系統(tǒng)相比，Intuvo GC/MSD 的重現(xiàn)性較好，且易于分析難分離的物質(zhì)，非常適用于復(fù)雜化合物的定性、定量分析。且在 Intuvo 超惰性流路、7650A 、HSS 7697A 的助力下，液體進樣和頂空進樣之間無需任何調(diào)整，盡顯智能、便捷等諸多優(yōu)勢!
2. 色譜分離結(jié)果
相比于傳統(tǒng)的 GC-FID 的方法，新的 Intuvo GC/MSD 方法顯著地改善了色譜譜圖的峰形和對稱性，避免了樣品基質(zhì)對 1,3-溴氯丙烷檢測的干擾，從而有利于提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。
圖 2. 采用新的 Intuvo GC/MSD 方法分析 1,3-溴氯丙烷所得到的色譜譜圖
3. 方法檢測限和定量限
得益于 Intuvo 9000 的超惰性流路設(shè)計，本方法具有優(yōu)異的 1,3-溴氯丙烷方法定量限 LOQ ( limit of quantitation )和檢測限 LOD ( limit of detection ) ，*產(chǎn)品質(zhì)控的需求。
表 2. 1,3-溴氯丙烷的 LOQ 和 LOD 
4. 新舊方法對比
經(jīng)過各項指標嚴謹?shù)乜甲C，新方法的各項內(nèi)容均合格并優(yōu)于傳統(tǒng)的 GC-FID 的方法，并表現(xiàn)出較好的專屬性和靈敏度。
表 3. 新方法的各項分析值
5. 系統(tǒng)適應(yīng)性
在系統(tǒng)適應(yīng)性考察過程中，要求連續(xù)進樣 5 針標準溶液 50.58 ng/ml 所得到的 1,3-溴氯丙烷峰面積的 RSD 值 ≤ 5.0%，而實測的新方法 RSD 值為 1.7% ; 要求連續(xù)進樣 5 針標準溶液加程序控制溶液所得到的 1,3-溴氯丙烷峰面積的 RSD 值 ≤ 7.5%，而實測的新方法 RSD 值為 4.5%。程序控制溶液也叫質(zhì)控標液，指標準溶液按照真實樣品的前處理程序完整地進行前處理后所得到的溶液。通過上述結(jié)果可以得到, 新的 Intuvo GC/MSD 方法具有出色的重現(xiàn)性，且系統(tǒng)適用性*符合要求。
表 4. Intuvo GC/MSD 方法的系統(tǒng)適用性結(jié)果 
綜上所述，在基因毒性物質(zhì)排查這一制藥企業(yè)重點關(guān)注的應(yīng)用領(lǐng)域中，新的 Intuvo 9000 GC/MSD 方法在系統(tǒng)適應(yīng)性、專屬性和其它各項方法學(xué)驗證指標核查方面均具有優(yōu)異的表現(xiàn)，并用自身的實力再一次的證明了其在制藥質(zhì)量控制方面突出的“保駕護航”作用。而該方法如此優(yōu)異的性能，也再一次證明了 Agilent Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)超惰性流路及多項創(chuàng)新技術(shù)的優(yōu)勢。