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使用安捷倫液相色譜柱前要了解什么？
閱讀：862 發(fā)布時(shí)間：2020-3-24
在安捷倫液相色譜柱使用前要仔細(xì)閱讀色譜柱附帶的說(shuō)明書(shū)，注意適用范圍，如pH值范圍、流動(dòng)相類型等;必須使用保護(hù)柱;色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑，兩端封死保存。
溶劑瓶中的沙芯過(guò)濾頭容易破碎，在更換流動(dòng)相時(shí)注意保護(hù)，當(dāng)發(fā)現(xiàn)過(guò)濾頭變臟或長(zhǎng)菌時(shí)，不可用超聲洗滌，可用35%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌。
流動(dòng)相使用前必須過(guò)濾，不要使用多日存放的蒸餾水。
檢測(cè)器的燈有使用壽命限制，一般在正式進(jìn)樣分析前30min左右開(kāi)啟D燈或W燈，分析結(jié)束，立即關(guān)燈。儀器運(yùn)行時(shí)，泵頭必須用10%異丙醇水溶液虹吸沖洗，不能干涸。
注意各流動(dòng)相所剩溶液的容積設(shè)定，若設(shè)定的容積低于zui低限會(huì)自動(dòng)停泵。
對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器當(dāng)使用緩沖溶液時(shí)要用水沖洗進(jìn)樣口同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次每次數(shù)毫升
若使用含鹽流動(dòng)相，開(kāi)機(jī)時(shí)必須先用10%甲醇水溶液沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動(dòng)相。
在使用安捷倫液相色譜柱之前，還要先了解樣品和雜質(zhì)的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等相關(guān)內(nèi)容。
樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè)，即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱。如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng)；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱，缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái)，基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn)。
如果樣品是堿性的；可選擇高純硅膠柱（高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾）或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱（如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等），他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。
如果堿性化合物的酸性太強(qiáng)，或堿性太強(qiáng)；可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)（優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價(jià)格也高）或者選用HILIC色譜柱，選擇強(qiáng)離子交換柱，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。