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厭氧菌的常規(guī)培養(yǎng)方法
厭氧菌的常用培養(yǎng)方法
厭氧菌培養(yǎng)是可以生長在沒有氧氣條件下的生物，有些厭氧菌可以在有氧氣條件下生產(chǎn)，屬于兼性厭氧；有些甚至不能容忍微量氧氣的環(huán)境；屬于專性厭氧。厭氧菌是非常普通的；很多都是人體正常菌群的一部分，厭氧微生物轉(zhuǎn)地球生物群的50%；在醫(yī)療系統(tǒng)感染中厭氧菌的檢出率至少在65%以上。厭氧菌屬于人體內(nèi)主要的正常菌群，在人體口腔、腸道、腫瘤、泌尿道較多；梭形桿菌主要存在于上呼吸道和口腔；消化球菌和消化鏈球菌存在于腸道、口腔、陰道和皮膚；丙酸桿菌常存在于皮膚、上呼吸道和陰道;韋永氏球菌則存在于口腔、上呼吸道、陰道和腸道。根據(jù)醫(yī)院的資料，厭氧菌在腹部感染中的檢出率為62%，在闌尾膿腫、闌尾切除術(shù)后切口化膿中占77%。厭氧菌不僅可引起嚴(yán)重的胸腹部感染和膿腫，而且很多嚴(yán)重的軟組織壞死性感染幾乎都與厭氧菌有關(guān)。因此，厭氧菌的分離和鑒定在臨床診斷和科研是非常重要的。
常用培養(yǎng)方法
厭氧手套箱(Anaerobic Chamber)是當(dāng)前臨床、科研實(shí)驗(yàn)室*合理的培養(yǎng)厭氧菌的儀器。越來越多的實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)意識到提高效率和節(jié)約成本必須從厭氧罐或厭氧袋轉(zhuǎn)移到厭氧培養(yǎng)箱。它不像一次性的厭氧袋或者厭氧罐，難免會將樣品暴露在空氣中；而厭氧培養(yǎng)箱的裸手袖套設(shè)計(jì)可自由處理樣品與嚴(yán)格的無氧環(huán)境，促使更快的樣品周轉(zhuǎn)，并且從材料的拆機(jī)到接種、培養(yǎng)、檢查等一系列的基本操作流程均是在厭氧環(huán)境下完成。它給操作者提供了既能在箱體內(nèi)進(jìn)行操作又能單獨(dú)進(jìn)行培養(yǎng)的厭氧環(huán)境。
厭氧培養(yǎng)箱采用連續(xù)焊接不銹鋼及有機(jī)玻璃密封而成，確保箱體的堅(jiān)固耐用。有機(jī)玻璃可一覽無余的觀察箱體內(nèi)的工作區(qū)域，視野*。有機(jī)玻璃上裝有兩個橢圓形密封門以及袖套，可通過橡膠袖套在箱內(nèi)進(jìn)行操作。操作流程：1、先將樣品傳遞室外門打開，把所需樣品放進(jìn)傳遞室；關(guān)上傳遞室的同時空氣也會隨之進(jìn)入到傳遞室。通過抽真空加入氣體的自動循環(huán)方式將傳遞室變?yōu)閰捬鯛顟B(tài)（真空壓力表可根據(jù)需求顯示以及設(shè)定數(shù)值）。2、將橡膠袖套也通過抽真空加入氣體的自動循環(huán)方式變?yōu)閰捬醐h(huán)境（真空壓力表可根據(jù)需求顯示和設(shè)定數(shù)值）。3、通過袖套打開密封門，把手伸入操作室內(nèi)將樣品傳遞室內(nèi)門打開，取出需樣品放到操作室進(jìn)行操作。4、操作臺內(nèi)部有電源插座，方便操作者用接種環(huán)為其菌落接種。5、把所需培養(yǎng)的培養(yǎng)皿或三角燒瓶放入操作室后背懸掛的培養(yǎng)室進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)；良好的溫度控制有利于菌落的生長繁殖，后通過肉眼或者顯微鏡來觀察判斷厭氧菌的生長情況。
箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài)的原理是將混合氣體填充進(jìn)入箱體，混合氣體中的氫氣會與箱體中剩余的氧氣在鈀催化劑的作用下生產(chǎn)水的原理。該箱體有特點(diǎn)：微電腦控制系統(tǒng)，通過指示燈顯示整個箱體的運(yùn)行狀態(tài)；樣品傳遞室及橡膠袖套分別單獨(dú)配有真空壓力表及排氧指示燈顯示；獨(dú)立超溫保護(hù)系統(tǒng)；操作室自動按鍵一次自動排氧達(dá)到厭氧環(huán)境；HEPA過濾器凈化過濾；內(nèi)置氣體壓力調(diào)節(jié)裝置等功能。均用來提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。保證厭氧培養(yǎng)箱給用戶提供一個嚴(yán)格的厭氧環(huán)境。為其后續(xù)的臨床或科研實(shí)驗(yàn)提供有力的技術(shù)支持！