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技術(shù)文章

鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8自身抗體檢測(cè)

閱讀:4764          發(fā)布時(shí)間:2018-5-28

什么是鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8?
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8是β細(xì)胞*的跨膜蛋白,其位于胰島素分泌顆粒中,參考膜內(nèi)外鋅離子濃度的調(diào)節(jié)。因此鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8也成為了1型糖尿病重要的自身抗原。
 
人類鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8大體結(jié)構(gòu)(氨基酸1-369):



鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8比較模型:

為什么要檢測(cè)ZnT8自身抗體?
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8自身抗體主要同鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8 C端結(jié)構(gòu)域結(jié)合,人群基因的多態(tài)性使第325氨基酸的密碼子可表達(dá)出三種蛋白質(zhì):精氨酸(R)325,色氨酸(W)325,少數(shù)情況下表達(dá)為谷氨酰胺(Q)325。鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8自身抗體可以特異性識(shí)別R325、W325類,或識(shí)別非特異性殘基325,極少數(shù)情況下可與Q型結(jié)合。RSR公司鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8自身抗體檢測(cè)試劑盒可定量檢測(cè)R325、W325以及非特異性殘基325型自身抗體。檢測(cè)鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8抗體可與檢測(cè)谷氨酸脫羧酶抗體、胰島細(xì)胞抗原2抗體等項(xiàng)目形成互補(bǔ)。相比于檢測(cè)單種抗體,同時(shí)檢測(cè)多項(xiàng)抗體陽性更具診斷價(jià)值。
 
IASP2015評(píng)測(cè)中使用RSR酶聯(lián)免疫法檢出鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8抗體、谷氨酸脫酸酶抗體、胰島細(xì)胞抗原2抗體:

 
35S標(biāo)記ZnT8免疫沉淀法與ElisaRSRTM ZnT8 AbTM性能比較
126例1型糖尿病患者(含已確診患者和疑似患者)同時(shí)接受35S標(biāo)記免疫沉淀法(IPA)和酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)。酶免法使用ElisaRSRTM ZnT8 AbTM試劑盒。

檢測(cè)結(jié)果:
共有95例患者經(jīng)兩種方法檢測(cè)(75%)均為抗體陽性。兩例患者經(jīng)過ELISA法檢測(cè)陽性但放射免疫法陰性,6例患者經(jīng)放射免疫法檢測(cè)陽性但ELISA法陰性。23例經(jīng)兩種檢測(cè)后均為陰性。由此可見兩種方法相關(guān)性較好,Pearson相關(guān)系數(shù)r=0.87。




在不同患者組中使用ElisaRSRTM ZnT8 AbTM檢測(cè)血清中自身抗體
共計(jì)227例1型糖尿病兒童患者,94例1型糖尿病成人患者,51例成人隱匿性自身免疫糖尿?。↙ADA)患者,100例兒童對(duì)照,297例成人對(duì)照,23例Addison病患者,26例風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者,24例Graves病患者以及24例橋本甲狀腺炎患者接受ElisaRSRTM ZnT8 AbTM試劑盒檢測(cè)血清抗體。

檢測(cè)結(jié)果:
163例(72%)1型糖尿病兒童患者,51例(54%)1型糖尿病成人患者,16例(31%)LADA患者,2例(2%)兒童對(duì)照,3例(1%)成人對(duì)照,2例(9%)Addison病患者以及1例(4%)Graves病患者檢出ZnT8抗體陽性。風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者和橋本甲狀腺炎患者未檢測(cè)出ZnT8抗體。
 
參考文獻(xiàn)

  1. Petruzelkova L, Ananieva‐Jordanova R, Vcelakova J, et al. The dynamic changes of zinc transporter 8 autoantibodies in Czech children from the onset of Type 1 diabetes mellitus[J]. Diabetic Medicine, 2014, 31(2): 165-171.
  2. Dunseath G, Ananieva-Jordanova R, Coles R, et al. Bridging-type enzyme-linked immunoassay for zinc transporter 8 autoantibody measurements in adult patients with diabetes mellitus[J]. Clinica Chimica Acta, 2015, 447: 90-95.

RSR鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8檢測(cè)試劑盒
檢測(cè)原理

產(chǎn)品性能
敏感度:76%,來自50例1型糖尿病患者血清(IASP 2015)
特異性:97%,來自90例健康人血清(IASP 2015)
標(biāo)準(zhǔn)品范圍:10-2000 units/mL
臨界值:陰性:<15 units/mL; 陽性:≥15 units/mL
交叉反應(yīng):24例橋本甲狀腺炎患者中無一例檢測(cè)為ZnT8抗體陽性(經(jīng)檢測(cè)患者血清中甲狀腺過氧化物酶抗體全部陽性,20例甲狀腺球蛋白抗體陽性)。24例Graves病患者中有1例檢測(cè)為ZnT8抗體陽性(經(jīng)檢測(cè)患者均為促甲狀腺激素受體抗體陽性)。23例Addison病患者中有2例(9%)經(jīng)檢測(cè)為ZnT8抗體陽性(經(jīng)檢測(cè)患者均為21-羥化酶抗體陽性)。
 
標(biāo)準(zhǔn)曲線
 
標(biāo)準(zhǔn)曲線與陽性樣本稀釋曲線

 
實(shí)驗(yàn)流程

 
實(shí)驗(yàn)計(jì)劃(樣本建議使用雙孔)
標(biāo)準(zhǔn)品需用18孔
每板zui多可檢測(cè)39份樣本
每盒可同時(shí)獨(dú)立開展3個(gè)檢測(cè)(96孔)(每個(gè)檢測(cè)可測(cè)試不超過7個(gè)樣本)

RSR系列產(chǎn)品—胰島細(xì)胞自身免疫系列

  1. 標(biāo)準(zhǔn)濃度單位為RSR單位(u/mL)
  2. 數(shù)據(jù)來自IASP2015
  3. 數(shù)據(jù)來自DASP2009

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