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技術(shù)文章

促甲狀腺激素受體抗體檢測(cè)(TRAb ELISA法)

閱讀:6033          發(fā)布時(shí)間:2018-5-22

歐洲1021721 B1,美國(guó)6844162 B1,日本4331403
注冊(cè)證號(hào):國(guó)械注進(jìn)20152403732
臨床意義:
TRAb也稱促甲狀腺激素(TSH)受體抗體,是鑒別甲亢、診斷Graves病的指標(biāo)之一;TRAb對(duì)Graves病的診斷、治療和預(yù)后的估計(jì)均具有重要的意義;Graves病患者TRAb陽(yáng)性率可達(dá)95%以上,故可作為Graves病的診斷依據(jù)。
臨床癥狀:
(1)本病多見于女性,以20-40歲者多見;
(2)典型的臨床表現(xiàn)主要包括高代謝癥、甲狀腺腫大和眼病三個(gè)方面;
(3)患者血清中存在多種自身抗體,特別是針對(duì)TSH受體的甲狀腺刺激抗體,與Graves病的甲狀腺功能亢進(jìn)有關(guān)。
GRAVES病發(fā)病機(jī)理:

試劑盒檢測(cè)原理:
在使用生物素標(biāo)記的促甲狀腺激素(TSH)與TRAb競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合TSH受體(TSHR)基礎(chǔ)上,加入生物素-鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶反應(yīng)機(jī)制。

產(chǎn)品特點(diǎn):特異性99%,靈敏度98%,臨界值1U/L(NIBSC90/672)
應(yīng)用范圍:各省、市級(jí)醫(yī)院均可開展
適用科室:檢測(cè)科,內(nèi)分泌科,核醫(yī)學(xué)科
適用儀器:酶標(biāo)儀(波長(zhǎng)450nm)
采用標(biāo)本:血清
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/盒
儲(chǔ)存條件及有效期:2-8℃保存,有效期一年
檢測(cè)流程:

所有試劑和樣本在使用前均應(yīng)達(dá)到室溫(20-25℃)
加樣:每孔加75ul 初始緩沖液(除去空白孔)
加樣:每孔加75ul 標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照和患者血清(除去空白孔)
孵育:ELISA 板振蕩器上室溫孵育2小時(shí)(500次/分)
棄去反應(yīng)液:微孔板
洗滌:洗板一次(如手工洗版,洗板后應(yīng)倒置在吸水紙上拍干)
加樣:每孔中加入100ul TSH-生物素(復(fù)溶)(除去空白孔)
孵育:室溫放置25分鐘,無(wú)需振蕩
棄去反應(yīng)液:微孔板
洗滌:洗板一次(如手工洗版,洗板后應(yīng)倒置在吸水紙上拍干)
加樣:每孔加入100ul SA-POD(1:20稀釋)(除去空白孔)
孵育:室溫放置20分鐘,無(wú)需振蕩
棄去反應(yīng)液:微孔板
洗滌:洗板3次(如手工洗版,則用稀釋好的洗液洗2次,純水洗1次,洗板后應(yīng)倒置在吸水紙上拍干)
加樣:每孔加入100ul TMB(包括空白孔)
孵育:避光室溫放置30分鐘,無(wú)需振蕩
加樣:每孔加入50ul 終止液(包括空白孔),振蕩5秒鐘
讀數(shù):450nm下讀取吸光度
不要在室溫25℃以上進(jìn)行該試驗(yàn)。

 

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