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藥物開發(fā) ∣ 斑馬魚等模式生物的高通量篩選方法介紹—Molecular Devices

時間:2018-8-31 閱讀:943
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斑馬魚等模式生物的高通量篩選方法介紹
       
自從20世紀70年代美國俄勒岡大學的George Streisinger教授利用斑馬魚進行遺傳學及發(fā)育生物學方面的研究以來,斑馬魚已越來越多地被應用于人類疾病的研究中。斑馬魚由于其與人類的高度生物相似性,成為了一種有用的藥物開發(fā)模型。如專業(yè)從事斑馬魚臨床前藥物評價的Zygogen公司,使用ImageXpress系列高內涵篩選系統(tǒng)進行包括血管生成、毒性篩選等多個應用方向的藥物評價,使用斑馬魚模型對化合物進行多濃度梯度的劑效關系的研究,并繪制需要至少十個以上樣品才能準確擬合的Dose-Response曲線并計算得到IC50。此外,由于斑馬魚體積小,所以可以放入微孔板中用化合物處理,然后其表型能使用高內涵篩選系統(tǒng)來進行檢測。

 

基于斑馬魚的體內實驗應用有大量的已開發(fā)的人類疾病斑馬魚模型如:
1.代謝綜合癥:肥胖 (內臟肥胖)、 血脂異常、脂肪肝、糖耐受失調
2.人類癌癥細胞異種移植:腫瘤血管生成、遠端轉移
3.循環(huán)疾?。盒牧λソ?、藥物誘導的心率失調
4.中央神經(jīng)系統(tǒng)失調:耳聾、視力障礙、嗅覺失調、癲癇、發(fā)育紊亂、睡眠喚醒障礙、肌營養(yǎng)不良 (ALS)

       

       
使用ImageXpress系列高內涵篩選系統(tǒng)來檢測斑馬魚胚胎模型具備以下三個主要優(yōu)勢:
:使用完整生命體在三維環(huán)境下幾天就能評價成千上萬的化合物
高靈活性:高內涵適合篩選很寬范圍的疾病和毒性模型,甚至不局限于斑馬魚
高質量:通過自動化高速堆疊拍攝從頭到尾保持拍攝在合適焦平面,避免景深帶來的不清晰
       
                               

下載實驗案例

 
       

參考文獻:
1. Zhang, B., et al., Quantitative phenotyping-based in vivo chemical screening

in a zebrafish model of leukemia stem cell xenotransplantation, PLoS One,

2014 Jan 15; 9(1).
2. Umemoto, N., et al., Fluorescent-based methods for gene knockdown and

functional cardiac imaging in zebrafish, Mol Biotechnol, 2013 Oct; 55(2): 131-

42.
3. Kanungo, J., et al., In vivo imaging and quantitative analysis of changes in

axon length using transgenic zebrafish embryos. Neurotoxicol Teratol, 2011

Nov-Dec; 33(6): 618-23.
4. Diekmann, H., et al., Characterization of optic nerve regeneration using

transgenic zebrafish. Front Cell Neurosci, 2015 April 9; 9:118.
5. Huan, H., et al., High-throughput screening for bioactive molecules using

primary cell culture of transgenic zebrafish embryos. Cell Rep, 2012 Sep 27;

2(3):695-704.

       
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