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    工業(yè)激光共焦顯微鏡脫離了傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的場(chǎng)光源和局部平面成像模式，采用激光束作光源，激光束經(jīng)照明針孔，經(jīng)由分光鏡反射至物鏡，并聚焦于樣品上，對(duì)標(biāo)本焦平面上每一點(diǎn)進(jìn)行掃描。 組織樣品中如果有可被激發(fā)的熒光物質(zhì)，受到激發(fā)后發(fā)出的熒光經(jīng)原來(lái)入射光路直接反向回到分光鏡，通過(guò)探測(cè)針孔時(shí)先聚焦，聚焦后的光被光電倍增管（PMT）探測(cè)收集，并將信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī)，處理后在計(jì)算機(jī)顯示器上顯示圖像。 在這個(gè)光路中，只有在焦平面的光才能穿過(guò)探測(cè)針孔，焦平面以外區(qū)域射來(lái)的光線在探測(cè)小孔平面是離焦的，不能通過(guò)小孔。因此，非觀察點(diǎn)的背景呈黑色，反差增加，成像清晰。由于照明針孔與探測(cè)針孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明針孔與探測(cè)針孔，焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測(cè)針孔處成像，即共聚焦。以激光作光源并對(duì)樣品進(jìn)行掃描，在此過(guò)程中兩次聚焦，故稱為激光掃描共聚焦顯微鏡。

    工業(yè)激光共焦顯微鏡從產(chǎn)生至今獲得了巨大的發(fā)展，掃描方式從zui初的狹縫掃描方式（掃描速度較快，圖像分辨率不高），到階梯式掃描技術(shù)（提高了圖像分辨率，標(biāo)本制備要求太高），再到驅(qū)動(dòng)式光束掃描器（掃描速度較快，符合共聚焦原理）。另外，目前激光掃描共聚焦顯微鏡的光源設(shè)計(jì)和分光采集技術(shù)也有較大的改進(jìn)，主要集中在如下幾個(gè)方面：

    （1） 現(xiàn)代的工業(yè)激光共焦顯微鏡可以根據(jù)研究需要選擇不同的激光器。選擇激光光源時(shí)，一方面要滿足研究工作對(duì)波長(zhǎng)的需求，另一個(gè)方面要考慮到激光光源的壽命。

    （2）一代激光掃描共聚焦顯微鏡可以用棱鏡狹縫分光的新技術(shù)，配上合適的激光源后，能夠擺脫傳統(tǒng)的波長(zhǎng)濾片組的限制，連續(xù)和自由地選擇*波長(zhǎng)。

    （3）用于工業(yè)激光共焦顯微鏡的物鏡也做了較大的改進(jìn)，不但具有平場(chǎng)復(fù)消色差特性，而且能與高速掃描功能相匹配。