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反相離子對(duì)試劑什么時(shí)候使用？
在介紹反相離子對(duì)試劑之前，我們先回憶一下離子對(duì)色譜法（Ion-pair chromatography，IPC），離子對(duì)色譜法可被看作是以分離離子樣品為目的的反相色譜法（Reversed-phase chromatography，RPC）的改良形式。IPC與RPC唯yi不同的條件是IPC在流動(dòng)相中添加了離子對(duì)試劑，這些試劑能在平衡過(guò)程與酸性化合物的A-或者堿性化合物的BH+發(fā)生相互作用。
“ 關(guān)于離子對(duì)試劑 "
離子對(duì)試劑是由強(qiáng)親水離子形成，反作用于樣品分子的中性離子對(duì)。因此，可用于同時(shí)分離帶電分子和非帶電分子。反相離子對(duì)色譜法是把離子對(duì)試劑加入到含水流動(dòng)相中，被分析的組分離子在流動(dòng)相中與離子對(duì)試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子，從而增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用，使分配系數(shù)增加，改善分離效果。
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一般情況下，在建立HPLC分離方法的時(shí)候，我們推薦由RPC開始，接著添加離子對(duì)試劑（僅當(dāng)有需要時(shí)）。舉個(gè)例子，當(dāng)我們已知某個(gè)峰是對(duì)應(yīng)一個(gè)酸性物質(zhì)、堿性物質(zhì)或中性物質(zhì)時(shí)，我們便能準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)出添加的IPC試劑對(duì)溶質(zhì)保留的影響。因此，當(dāng)改變RPC的其他條件仍不能達(dá)到合適的分離度時(shí)，我們可以通過(guò)使用IPC試劑不斷改變酸性溶質(zhì)和堿性溶質(zhì)的保留行為從而改善他們的分離效果。
那么，IPC在什么時(shí)候或者應(yīng)用于什么物質(zhì)的分離會(huì)是比較合適的分離方法呢？在樣品出現(xiàn)以下特點(diǎn)時(shí)我們就可以考慮使用離子對(duì)試劑：
（1）在反相色譜柱上不保留或保留弱；
（2）化合物帶有強(qiáng)離子官能團(tuán)，如羧基、銨基、氨基等；
（3）化合物在反相體系流動(dòng)相中有足夠的溶解度。
使用離子色譜法可令樣品的保留行為產(chǎn)生類似于改變流動(dòng)相的pH的變化，但是離子對(duì)色譜法能更好的控制酸性溶質(zhì)或堿性溶質(zhì)的保留行為，而且無(wú)須使用ji端的流動(dòng)相pH（如，pH＜2.5或pH＞8.0）。
“常見的離子對(duì)試劑"
常見的離子對(duì)試劑主要包括如下幾類：
陰離子對(duì)試劑：四丁基氫氧化銨、四丁基溴化銨等堿性試劑，適用于結(jié)構(gòu)式中含磺酸基、羧基等的極性化合物。
陽(yáng)離子對(duì)試劑：甲烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉等，適用于結(jié)構(gòu)式中含銨基、氨基等的極性化合物。
其他離子對(duì)試劑：高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。