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純水色譜柱，耐受原理知一二
哈哈，看到月旭的色譜柱給老師們解決了實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，小編心里真是很樂(lè)滋滋呢~月旭的AQ色譜柱也是可以耐受100%純水相的色譜柱，對(duì)強(qiáng)極性化合物的保留的確很不錯(cuò)的。那么對(duì)于常見(jiàn)的反相C18色譜柱，能夠耐受100%水相的還有哪些呢？耐受的原理又是如何呢？今天就跟小編一起來(lái)了解一下吧~
疏水基團(tuán)低鍵合密度
我們都知道，反相C18色譜柱在保留時(shí)，水相比例一般不宜大于90%，而極性化合物在C18柱上的保留行為較弱，有時(shí)甚至有機(jī)相比例降至5%也沒(méi)有很好的保留，但過(guò)高比例的水相易使C18鏈發(fā)生蜷縮，得不到充分的潤(rùn)濕和舒展，大大降低C18色譜柱的保留能力。像上面對(duì)話中老師用到的月旭Ultimate® AQ-C18色譜柱，就是通過(guò)降低疏水基團(tuán)（即C18）的鍵合密度，da程度降低C18鏈的坍縮，從而大限度地增加極性化合物的保留。月旭Ultimate® AQ -C18色譜柱在高含水量的流動(dòng)相中，對(duì)有機(jī)酸、核苷等水溶性強(qiáng)極性化合物具有較好的保留能力。
圖1 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離6種有機(jī)酸
圖2 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離5種核苷酸
側(cè)鏈基團(tuán)位阻
普通C18鏈對(duì)于水相的不耐受還體現(xiàn)在高比例水相或鹽相下，鍵合相易受到水分子或鹽分子的作用從而造成鍵合相水解脫落。對(duì)于這一作用，月旭科技的Ultimate® LP-C18則完美的解決了該問(wèn)題。通過(guò)在C18烷基側(cè)鏈引入較大的官能團(tuán)，其空間立體效應(yīng)阻礙了流動(dòng)相分子對(duì)鍵合相硅氧鍵的作用。同時(shí)，由于Ultimate® LP-C18的未封尾特性，使得該系列色譜柱在酸性條件下（pH可低至0.5）依舊擁有*的耐受能力。
圖3 月旭Ultimate® LP系列色譜柱鍵合相示意圖
封尾工藝
常見(jiàn)的C18色譜柱都是使用*基氯硅烷封尾試劑來(lái)對(duì)色譜柱進(jìn)行封尾，而如果使用含有極性官能團(tuán)，或含有親水端基的封尾試劑進(jìn)行封尾，就能夠很好地改善與100%水相的兼容性，同時(shí)，由于加入了極性親水基團(tuán)，取代了大量的硅醇基位點(diǎn)，在分析堿性化合物的時(shí)候能有效防止堿性化合物與硅醇基的相互作用，改善峰形。月旭Ultimate®ODS-3色譜柱，月旭Ultimate® ALK-C18色譜柱等，就是采用的該鍵合工藝。
圖4 極性親水基團(tuán)試劑封尾工藝
極性基團(tuán)嵌入
給色譜柱鍵合相嵌入極性基團(tuán)的作用原理類似于極性基團(tuán)封尾，區(qū)別是極性基團(tuán)加入的位置是嵌入到C18鏈中。極性嵌入基團(tuán)有利于增加水分子在烷基鏈表面的濃度，提高對(duì)極性化合物的保留，及水相的耐受，例如月旭Ultimate® Polar-RP色譜柱。
圖5 極性嵌入基團(tuán)C18柱
極性官能團(tuán)的嵌入，也可以通過(guò)氫鍵作用，將硅羥基或解離的硅氧負(fù)離子屏蔽起來(lái)（見(jiàn)下圖），進(jìn)而保證堿性化合物的峰形。
圖6 月旭Ultimate® Polar-RP內(nèi)嵌極性官能團(tuán)對(duì)硅氧負(fù)離子的屏蔽作用
這樣看來(lái)，分析極性親水化合物的時(shí)候，可耐受純水的色譜柱真是優(yōu)勢(shì)明顯呢，難怪老師們對(duì)月旭的色譜柱贊美有加了。耐受純水的色譜柱由于上述種種工藝的不同，有時(shí)在方法開(kāi)發(fā)的時(shí)候還能提供不一樣的保留特性，使得許多分離復(fù)雜極性樣品的問(wèn)題迎刃而解。