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月旭科技(上海)股份有限公司>>技術(shù)文章>>2020版中國(guó)藥典新增檢測(cè)項(xiàng)目——聚乙二醇分子量分布測(cè)定

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2020版中國(guó)藥典新增檢測(cè)項(xiàng)目——聚乙二醇分子量分布測(cè)定

閱讀:7851        發(fā)布時(shí)間:2019/10/16
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新增項(xiàng)目

近在瀏覽國(guó)家藥典委員會(huì)網(wǎng)站的時(shí)候,驚奇的發(fā)現(xiàn)聚乙二醇300,400,1000……全部的聚乙二醇品種藥典方法都要修訂了!在瀏覽了公示方法,發(fā)現(xiàn)原來(lái)是新增了一個(gè)項(xiàng)目,從2020版藥典開(kāi)始要標(biāo)明重均分子量及分子量分布系數(shù)的標(biāo)示值(按所附測(cè)定方法測(cè)定),那各位小伙伴了解分子量及分子量分布測(cè)定方法嗎?這里就給大家詳細(xì)講講。

 

2020版中國(guó)藥典征求意見(jiàn)稿之分子量及分子量分布測(cè)定方法

分別稱取聚乙二醇600、聚乙二醇1000、聚乙二醇4000、聚乙二醇7000、聚乙二醇10000分子量對(duì)照品適量,加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為對(duì)照品溶液。稱取樣品適量,加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為供試品溶液。照分子排阻色譜法(通則0514)測(cè)定,采用適宜分離范圍的凝膠色譜柱,以0.1mol/L硝酸鈉溶液(含0.02%抑菌劑)為流動(dòng)相,示差折光檢測(cè)器;檢測(cè)器溫度35℃,柱溫35℃,取對(duì)照品溶液各100μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖,由GPC軟件計(jì)算回歸方程,線性相關(guān)系數(shù)R應(yīng)不得小于0.99。取供試品溶液100μl,同法測(cè)定,根據(jù)回歸方程計(jì)算供試品的重均分子量及分子量分布。供試品的重均分子量應(yīng)為標(biāo)示值的90%~110%,分布系數(shù)應(yīng)為產(chǎn)品標(biāo)示值的90%~110%。

 

什么是分子排阻色譜法

分子排阻色譜法是根據(jù)待測(cè)組分的分子大小進(jìn)行分離的一種液相色譜技術(shù)。分子排阻色譜法的分離原理為凝膠色譜柱的分子篩機(jī)制。色譜柱多以親水硅膠、凝膠或經(jīng)過(guò)修飾的凝膠如葡聚糖凝膠(Sephadex)和瓊脂糖凝膠(Sepharose)等為填充劑,這些填充劑表面分布著不同孔徑尺寸的孔,藥物分子進(jìn)入色譜柱后,它們中的不同組分按其分子大小進(jìn)入相應(yīng)的孔內(nèi),大于所有孔徑的分子不能進(jìn)入填充劑顆粒內(nèi)部,在色譜過(guò)程中不被保留,早被流動(dòng)相洗脫至柱外,表現(xiàn)為保留時(shí)間較短;小于所有孔徑的分子能自由進(jìn)入填充劑表面的所有孔徑,在色譜柱中滯留時(shí)間較長(zhǎng),表現(xiàn)為保留時(shí)間較長(zhǎng);其余分子則按分子大小依次被洗脫。

 

分子排阻色譜法應(yīng)用案例

月旭科技Xtimate® SEC色譜柱是硅膠基質(zhì)的分子排阻色譜柱,其色譜填料為高純度、具有良好穩(wěn)定性的硅膠微球表面鍵合親水性聚合物。月旭科技采用特殊的表面修飾技術(shù),確保了該填料具有良好的穩(wěn)定性和批次重現(xiàn)性。

Xtimate® SEC色譜填料采用*的化學(xué)鍵合技術(shù),在硅膠表面鍵合了親水性聚合物以及親水性二醇基官能團(tuán),雙重鍵合機(jī)制使水溶性高分子聚合物蛋白、生物酶、多肽等生物樣品的非特異性吸附極小,因而可廣泛應(yīng)用于水溶性聚合物及生物大分子的分離和測(cè)定。

月旭科技采用Xtimate® SEC-300 (7.8*300mm,5μm)兩根色譜柱串聯(lián)的方式成功分離檢測(cè)聚乙二醇40k,20k,12k,5k含量。

色譜柱:月旭Xtimate® SEC-300 (7.8*300mm,5μm)兩根色譜柱串聯(lián)

流動(dòng)相:高純水

檢測(cè)波長(zhǎng):示差檢測(cè)器

柱溫:柱溫40℃,檢測(cè)器40℃

流速:1.0ml/min

進(jìn)樣量:20μl

 

 

各位小伙伴想了解更多有關(guān)分子排阻色譜法的相關(guān)信息,請(qǐng)咨詢?cè)u(píng)論。

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