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島津應(yīng)用：利用LC-MS/MS 考察 CHO 細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，為促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖提供物質(zhì)基礎(chǔ)，是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。合成細(xì)胞培養(yǎng)基是用化學(xué)成分明確的試劑配制的培養(yǎng)基，是目前常用的一類培養(yǎng)基，其組分穩(wěn)定，主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽類等。培養(yǎng)基組分的變化，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生一定影響，如細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)、分裂速度等。同時(shí)，適宜的培養(yǎng)基組成與優(yōu)選的細(xì)胞培養(yǎng)工藝對(duì)于提高蛋白類藥物的產(chǎn)率，保證細(xì)胞培養(yǎng)批次之間的一致性、穩(wěn)定關(guān)鍵質(zhì)量屬性等因素至關(guān)重要。因此，尋求一類合適的培養(yǎng)基組成，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)具有重大意義。細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的分析，除形態(tài)學(xué)觀察外，還可對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞代謝物進(jìn)行分析，通過(guò)考察細(xì)胞上清液中營(yíng)養(yǎng)物和代謝物的變化，判斷細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖過(guò)程中狀態(tài)的優(yōu)劣。鑒于此，我們開(kāi)發(fā)了“細(xì)胞培養(yǎng)上清液方法包”，該技術(shù)可在 17 分鐘內(nèi)同時(shí)分析 95 種細(xì)胞培養(yǎng)上清液營(yíng)養(yǎng)成份和代謝物的相對(duì)豐度變化。
本文使用島津超液相色譜儀 LC-30A 和三重四極桿質(zhì)譜 LCMS-8060 聯(lián)用，結(jié)合“細(xì)胞培養(yǎng)上清液方法包”建立了細(xì)胞培養(yǎng)上清液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的同時(shí)分析方法，為相關(guān)研究人員評(píng)估細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、改進(jìn)培養(yǎng)基組分提供參考。
島津三重四極桿質(zhì)譜 LCMS-8060
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