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島津司小令大講堂丨第三期 溶解的空氣(氧)對檢測的影響

閱讀:389        發(fā)布時間:2020-3-27

 

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第三期

溶解的空氣(氧)對檢測的影響

 

形成氣泡產(chǎn)生的影響較容易被理解,它往往使壓力波動,造成基線噪聲。然而,有時溶于溶劑的空氣并不形成氣泡,但其造成的影響依然是嚴(yán)重的,且不易被發(fā)現(xiàn)。

 

 

1、 大量溶解的氧氣對檢測的影響

溶解于溶劑的氣體中,氧氣對檢測的影響大,而且是多方面的。即使在當(dāng)時的溫度、壓力下,溶解于溶劑的量并不飽和,不足以形成氣泡,其影響還是相當(dāng)嚴(yán)重的。

 

 

 

I)熒光檢測:當(dāng)使用熒光檢測器來測定萘、芘等多核芳香烴或維生素E等生育酚時,溶解于流動相中的氧,由于熒光猝滅而影響化合物熒光強度,干擾測定。此時,盡管基線稍有降低,峰高的降低則更為明顯。例如,當(dāng)大量氧氣溶于流動相對;測得萘的熒光強度(峰面積)只有*脫氣以后萘的峰面積的25%。

 

氧氣有可能吃掉熒光

 

 

II)電化學(xué)測定:特別是在還原電位下測定時,由于氧的濃度高,產(chǎn)生還原電流使信噪比變差。

 

2、 大量或可變的溶解氧對紫外檢測的影響

在紫外區(qū),氧本身就有吸收,使測得結(jié)果和基線都偏高,例如在210nm飽和有空氣的甲醇(氧的分壓 0.2大氣壓)在過氦脫氣以后,基線可降低0.32吸收單位(圖一)。

 

 

圖一:210nm測定時脫氣與否對基線的影響

 

由引可見,經(jīng)過脫氣可大大降低紫外區(qū)的背景。另一方面,氧氣的存在不僅使基線變高,而且當(dāng)氧氣的濃度隨著壓力、溫度等諸因素變化而變化時,將使基線波動十分嚴(yán)重。由上例可知,如果在滿標(biāo)尺 0.01吸收單位測定時,氧的濃度變化1%,將引起基線相當(dāng)于30%滿標(biāo)尺的變化。此外,當(dāng)使用含氧的甲醇等作梯度洗脫時,隨著流動相甲醇的含量增多而升高的基線,有可能影響進一步的數(shù)據(jù)處理(見圖二)

 

 

圖二:水-甲醇梯度洗脫時,脫氣與否對210nm處測定基線的影響,甲醇在30分鐘內(nèi)由20-60%變化,然后維持5分鐘

 

溶解氧的影響在短波區(qū)較為明顯,但也與溶劑種類有關(guān),例如溶解氧對四氫呋喃的影響一直延伸至254mm處,在254 mm處,溶解氧的影響由四氫呋喃,甲醇、乙腈、水逐漸降低。就乙腈而言,即使在較短長區(qū)影響也不明顯。因此,同樣的氧氣濃度、對不同的溶劑其影響也不同,可見其吸收的增加并非*由于自身的吸收,也許還與氧與溶劑雜質(zhì)之間的某些反應(yīng)有一定的關(guān)系。

 

進行紫外波外區(qū)高靈敏測定時,一般采用乙腈較好,如果為了提高分離效率,則一定要控制好溶解氧的量,換言之,必須采用適當(dāng)?shù)拿摎馐侄巍?/span>

 

3、 溶解空氣量的變化引起示差檢測時的基線漂移

 

折射率不僅與液體中固體或液體溶質(zhì)的濃度有關(guān),也與氣體溶質(zhì)的濃度有關(guān)。因此,由于溫度變化而引起氣體溶解量的變化,將使折射率基線漂移波動。例如以四氫呋喃為溶劑,在滿標(biāo)尺為8×10-6折射率單位的情況下測定時,溶劑中空氣的溶解量改變1%,則導(dǎo)致10%以上的基線變化。要抑制此種干擾,需使流動相處于恒溫,或用氦置換溶解的其它氣體,相對而言,氦的溶解度隨溫度的變化較小。

 

 

 

圖三:對示差檢測器基線的影響

 

綜上所述,即使未形成氣泡,溶解的空氣對測定還是有影響的。

 

 

下期預(yù)告

流動相脫氣方法

敬請期待!

 

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