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動物性食品、水產(chǎn)品中硝基呋喃類藥物殘留檢測方法
硝基呋喃類藥物(Nitrofrans)是一類人工合成的廣譜抗菌藥物，具有很好的抗菌作用和藥動學(xué)特性。因其抗菌譜廣、抑菌作用不受膿液和組織分解產(chǎn)物影響、口服吸收迅速、不易產(chǎn)生耐藥性、與其他抗茵藥無交叉耐藥性、價(jià)格便宜、使用方便且具有促生長作用，曾經(jīng)廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)臨床預(yù)防和治療由大腸桿菌或沙門氏菌引起的腸炎、癤瘡、潰瘍病、赤鰭病等疾病，并且對某些原蟲、真菌有一定的作用。常見的硝基呋喃類藥物有呋喃唑酮(FZD)、呋喃它酮(FTD)、呋喃髑林(NFz)、呋喃妥岡、硝呋索爾(NFs)等。其主要代謝產(chǎn)物分別為3-氨基、惡唑烷酮(AOZ)、5-嗎啉基甲基、3-氨基-2-惡唑烷酮(AMOZ)、1-氨基乙內(nèi)酰胺(AHD)、氨基脲(SEM)、3,5-二硝基水楊酸肼(DNSH)[1-3]。
酶聯(lián)免疫分析法是一種固相免疫測定技術(shù)，首先將抗體或抗原包被到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。在測定時(shí)，使待檢樣本和酶標(biāo)抗體或抗原按不同步驟與固相載體表面吸附的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)，后加入的酶標(biāo)抗體與免疫復(fù)合物結(jié)合，用洗滌的方法分離抗原抗體結(jié)合物和游離的未結(jié)合成分，zui后加入酶反應(yīng)底物，根據(jù)底物被酶催化產(chǎn)生的顏色及其吸光度(A)值的大小進(jìn)行定性或者定量分析方法。該方法把抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶的催化作用有機(jī)結(jié)合起來，已被，。泛應(yīng)用于殘留檢測過程中。2001年，Gao Aizhon成功制得用于檢測SEM的特異性單克隆抗體，對SEM的zui低檢測限為0.01ug/L。2004年，Cooper等制備得到了AOZ多克隆抗體，建立了蝦組織中AOZ的酶聯(lián)免疫分析方法(ELISA)，該方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、價(jià)格便宜等特點(diǎn)。隨后，Diblikova、Franek等制備得到了AOZ單克隆抗體，建立了組織中AOZ的ELISA檢測方法，單克隆抗體較多克隆抗體特異性更好，穩(wěn)定性更高，該方法的zui低檢出限可0.3ug/kg。2007年，Cooper等在研究得到SEM的多克隆抗體[4]，利用間接ELISA法對殘留在雞肉中的SEM進(jìn)行檢測，zui低檢測限為0．25I．tg/kg。2009年，LiJun等應(yīng)用間接競爭ELISA法對肉雞飼料中的NFT，F(xiàn)TD，NFZ，F(xiàn)ZD進(jìn)行了檢測，并應(yīng)用HPLC法進(jìn)行驗(yàn)證，方法的檢測限范圍為0.2-2.1ug/g，空白添加回收率范圍為75.9-86.4％。2010年，LiJun等以5-硝基糠醛為分子模板合成了硝基呋喃類藥物的共有半抗原，分別采用重氮法和戊二醛法合成了兩種免疫抗原和兩種包被抗原，zui終建立了一種能夠檢測7種硝基呋喃類藥物的廣譜特異性間接競爭ELISA方法。該法對NFZ、NFX、NFS、FZD、FTD、NFT的zui低檢測限分別為8.3、14.0、15.8、11.0、11.0、13.5ng/g，而且所得結(jié)果與液相色譜法檢測結(jié)果一致。若將該方法應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)過程中，將會有效的從源頭上遏制動物性食品中硝基呋喃類藥物及其代謝產(chǎn)物的殘留。2011年Jiang Wen xiao研究出法檢測4種動物組織中的AHD的ELISA方法，并采用LC-MS/MS法進(jìn)行論證，試驗(yàn)結(jié)果證明兩種方法有很好的相關(guān)性，ELISA法具有簡單、快速、準(zhǔn)確并且不需要特殊試驗(yàn)設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)[5, 6]。目前，國內(nèi)外用于檢測AOZ、AMOZ、SEM和AHD的商品化試劑盒已經(jīng)上市，但未見有針對NTV和NFX及其代謝產(chǎn)物的免疫檢測檢測或產(chǎn)品。
硝基呋喃類藥物殘留檢測儀采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理,即酶聯(lián)免疫法；藥物殘留快速檢測儀可定量快速檢測阿莫西林、孔雀石綠、磺胺類、黃曲霉毒素(B1，B2，G1，G2 M1 M2 )、疾病診斷、三聚氰胺檢測、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、 紅霉素、氯霉素、土霉素、四環(huán)素、 磺胺類(總量)、喹乙醇、已烯雌酚、硝基呋喃類等有毒有害物質(zhì)及抗生素殘留檢測。并且可以連接食品安全監(jiān)控系統(tǒng)。 藥物殘留快速檢測儀廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場、屠宰場、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)、檢驗(yàn)檢疫單位使用。
硝基呋喃類藥物殘留檢測儀技術(shù)參數(shù)：
☆波長范圍:300nm-1000nm
☆波長準(zhǔn)確度:±2nm
☆吸光度范圍: 0.000~4.000ABS
☆分辨率 :0.001Abs
☆穩(wěn)定性 : ±0.001A/hr
☆透射比重復(fù)性: ≤0.5%T
☆光源 : 進(jìn)口LED
☆樣品池 : 微孔板