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石蠟包埋組織單細胞樣品制備方法存在的問題
石蠟包埋組織單細胞制備方法的建立,使流式細胞術在腫瘤研究中得到更加廣泛的應用。主要存在如下問題。
1、樣品中的碎片較多,所獲得的DNA組方圖質(zhì)量不及新鮮組織好,組方圖的細胞峰較寬,細胞峰CV值較大。
2、異倍體率較少。由于組方圖的細胞峰CV值增大,一些接近于二倍體的DNA異倍體峰位被掩蓋。
3、S期細胞百分比不如新鮮組織的S期計算準確,百分比計數(shù)往往偏高,這仍然與細胞峰增寬有關。
4、DNA二倍體標準不穩(wěn)定。在石蠟包埋腫瘤DNA倍體分析研究中,發(fā)現(xiàn)正常組織細胞的DNA含量與雞紅細胞DNA含量比值增大。解決二倍體標準不穩(wěn)定的辦法,可將正常組織與腫瘤組織同時包埋于一個石蠟組織塊中,這樣,正常細胞作為一個二倍體內(nèi)標準,能減少DNA倍體分析的誤差。
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