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青島捷世康生物科技有限公司
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DNA重組技術的基本過程

時間:2016-3-28閱讀:1302
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蛋白質工程介紹:

    1982年,Palmiter等人將大白鼠的 生長激素基因放在小白鼠金屬疏基蛋白啟動子之后的質粒中。

    這個啟動子通常在染色體上,并控制金屬疏基蛋白的轉錄。金屬疏基蛋白富含半肽氨酸,對重金屬有很高的親和力。肝臟在合成這種保護性蛋白時要依靠重金屬,如鎘的誘導。

   將重組好的這種質粒(幾百個拷貝)用特制的微量注射器注入小白鼠受精卵植入小白鼠子宮。結果發(fā)育生成的小鼠經DNA印跡法證明,許多小鼠中都含有大白鼠的生長激素基因,而且成熟的小鼠體重比對照大兩倍,成為“碩鼠”或“超級鼠”。這些小鼠中的生長激素水平相當于對照的500倍。試驗證明,外源基因在新的啟動子控制下,可以整合到哺乳類細胞核內,并在其中實現有效表達。這是一項重大的突破。

    隨后轉基因動物在各國興起。北京農業(yè)大學也制備出轉基因豬和羊。然而轉生長激素基因的豬的繁殖能力明顯下降,不能繁殖擴群。國內轉基因動物也出現了畸形等。這些問題的出現表明轉基因技術中有關外源基因與染色體的定位重組、表達調控等,還有待深入研究。

    但轉基因技術仍然是有用的。1991年,蘇格蘭人首先將a1-抗胰蛋白酶基因置于綿羊的乳球蛋白基因的調控成分之下,制成轉基因綿羊。當這種綿羊長大繁殖,乳腺內基因開發(fā)表達奶中各種蛋白時,a1-抗胰蛋白酶基因在球蛋白調控成分調控下也開發(fā),結果表達出a1-抗胰蛋白酶(一種藥物),奶中含量高達35g/L,產量十分可觀。這種轉基因的動物稱為“生物反應器”,它潛在的經濟效應將促進這項技術的發(fā)展。

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