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青島捷世康生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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螺旋體染色液(Levaditi銀法)說(shuō)明書(shū)

時(shí)間:2024/12/6閱讀:368
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

螺旋體(spirochaeta)是一類(lèi)細(xì)長(zhǎng)、彎曲呈螺旋狀、運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物,具有細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu),細(xì)胞壁有脂多糖和壁酸,螺旋體分為密螺旋體(如梅毒螺旋體)、疏螺旋體(如回歸熱螺旋體)、鉤端螺旋體等;梅毒螺旋體有 8~12均勻的螺旋,兩端尖直;鉤端螺旋體細(xì)長(zhǎng),數(shù)目較多而且細(xì)密,一端或兩端彎曲呈鉤狀,菌體亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋體和鉤端螺旋體可用鍍銀法進(jìn)行顯色,如 Levaditi 法、Warthin-Starry 法。

螺旋體染色液(Levaditi 銀法)是利用螺旋體具有的嗜銀性,在一定條件下螺旋體可從銀液中吸附銀離子,經(jīng)還原液處理后,螺旋體內(nèi)吸附的銀離子被還原為黑色的金屬    銀而顯色,主要用于顯示梅毒螺旋體,亦可顯示鉤端螺旋體,但較少顯示熱回歸螺旋體,對(duì)肝臟梅毒樹(shù)膠腫和肝臟鉤端螺旋體具有鑒別作用。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考):

1、組織切片厚度1~2mm 為佳,置于10%福爾馬林中固定2~4天。

2、流水沖洗過(guò)夜。

3、95%乙醇浸泡24h,蒸餾水浸洗并不停搖動(dòng),直至組織下沉為止。

4、更換新的蒸餾水浸洗 10min。

5、入銀溶液加蓋置于37℃恒溫箱孵育1天,更換新的銀溶液,繼續(xù) 37℃恒溫箱孵育2 天。

6、蒸餾水浸洗3次,每次10min。

產(chǎn)品組成:

名稱(chēng)

規(guī)格

3×50ml

 

Storage

試劑(A):銀溶液

2×50ml

RT 避 光

(B): Levaditi 還原液

B1: Levaditi 還原液 A

25ml

RT 避 光

B2: Levaditi 還原液 B

25ml

RT

臨用前,按 B1:B2=1:1 混合,即為 Levaditi 還原液,即配即用。

使用說(shuō)明書(shū)

1 份










7、入配制好的 Levaditi 還原液,加蓋室溫避光孵育2天。

8、蒸餾水浸洗3次,每次 2min。

9、常規(guī)脫水透明,浸蠟包埋。

10、切片厚度6~8μm,貼片,烤干。

11、二甲苯或 脫蠟透明液脫蠟 2 次,中性樹(shù)膠封固。

染色結(jié)果:


梅毒螺旋體、鉤端螺旋體

黑色或棕黑色

背景

淡黃至棕黃色




注意事項(xiàng):

1、 實(shí)驗(yàn)所用器皿需用硫酸洗液浸泡,洗干凈。

2、 步驟4、5的洗片步驟很有必要,一定要把組織中的甲醛和乙醇充分清除,否則易導(dǎo)致組織內(nèi)銀鹽的沉淀。

3、 某些細(xì)菌和真菌菌絲也會(huì)被該染液染成黑色,應(yīng)注意螺線體為螺旋狀形態(tài),并加以鑒別。

4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。    

5、 試劑開(kāi)封后請(qǐng)盡快使用,以防影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。

 

有效期:12個(gè)月有效。



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