本試劑盒是一種簡(jiǎn)單易行的通過(guò)紫外比色來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性的試劑盒。絕大部分細(xì)胞內(nèi)的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶都是含硒的，且硒為該酶的活性中性組成部分。細(xì)胞內(nèi)也有很少量的不含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶存在。本試劑盒可以定量檢測(cè)出比較常見(jiàn)的含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和少量不含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的總量。本試劑盒可檢測(cè)組織勻漿產(chǎn)物、細(xì)胞裂解產(chǎn)物等樣品中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活性。一個(gè)試劑盒可進(jìn)行100次檢測(cè)。

   本試劑盒如果和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒(YT298)配合使用，可以定量檢測(cè)出樣品中不含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶。

    谷胱甘肽過(guò)氧化物酶可以清除活細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化物，在保護(hù)細(xì)胞免受自由基損傷過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。細(xì)胞內(nèi)的脂類容易和自由基發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生脂類過(guò)氧化物。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶可以利用還原型谷胱甘肽(GSH)還原脂類過(guò)氧化物，從而消除自由基的毒害作用。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶幾乎在所有組織中都有分布。在一些病理狀況下谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力會(huì)發(fā)生明顯上調(diào)或下調(diào)。

     谷胱甘肽過(guò)氧化物酶可以利用還原型谷胱甘肽(GSH)催化過(guò)氧化氫以及許多有機(jī)過(guò)氧化物，產(chǎn)生水或有機(jī)醇。如果以過(guò)氧化氫為底物進(jìn)行檢測(cè)，則同樣可以分解過(guò)氧化氫的過(guò)氧化氫酶的酶活性會(huì)干擾谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的測(cè)定。本試劑盒利用了一種間接測(cè)定的方法。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶可以催化GSH產(chǎn)生GSSG，而谷胱甘肽還原酶可以利用NADPH催化GSSG產(chǎn)生GSH，通過(guò)檢測(cè)NADPH的減少量就可以計(jì)算出谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力水平。在上述反應(yīng)中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶是整個(gè)反應(yīng)體系的限速步驟，因此NADPH的減少量和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力線性相關(guān)。

本試劑盒利用了如下的反應(yīng)原理，GPx為谷胱甘肽過(guò)氧化物酶，GR為谷胱甘肽還原酶，R-OOH為過(guò)氧化物。


   本試劑盒提供的有機(jī)過(guò)氧化物試劑(Cum-OOH)在沒(méi)有谷胱甘肽過(guò)氧化物酶存在的情況下不會(huì)和GSH產(chǎn)生反應(yīng)，也不會(huì)被細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化氫酶催化而分解。因而可以較為特異地檢測(cè)出谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力。

   有機(jī)過(guò)氧化物試劑(Cum-OOH)不僅可以作為含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的底物，也可作為不含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的底物，因此本試劑盒可以定量檢測(cè)總谷胱甘肽過(guò)氧化物酶。


試劑盒組份：
樣品勻漿液———————————————100ml
谷胱甘肽過(guò)氧化物酶檢測(cè)緩沖液——————50ml
谷胱甘肽還原酶—————————————160μl
NADPH——————————————————15mg
還原型谷胱甘肽(GSH)———————————14mg
過(guò)氧化物試劑(Cum-OOH)——————————200μl

注意事項(xiàng)：
1. 本試劑盒檢測(cè)時(shí)牽涉到氧化還原反應(yīng)，所有氧化劑或還原劑都會(huì)干擾本試劑盒的測(cè)定。如果在樣品中的還原劑無(wú)法避免，例如DTT、巰基乙醇等，則這些還原劑的總濃度至少低于0.1mM。0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
2. 常用的Triton X-100、Tween 20等去垢劑都含有較高水平的過(guò)氧化物，會(huì)影響本試劑盒的測(cè)定。如果必須使用這些去垢劑，使用純度較高并注明含較低過(guò)氧化物的去垢劑。
3. 為消除樣品中可能含有的可以消耗NADPH的酶的干擾，可以檢測(cè)不加過(guò)氧化物試劑的樣品作為對(duì)照。
4. 樣品可以立即測(cè)定，也可以-70℃凍存待以后測(cè)定。
5. 一定要嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)的溫度，否則會(huì)引起較多誤差。
6. NADPH不太穩(wěn)定，要嚴(yán)格按照后續(xù)說(shuō)明操作，謹(jǐn)防失活。
7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期一年。