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純牛奶菌落總數(shù)的測定方法

閱讀:1723      發(fā)布時間:2024-5-29
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優(yōu)質(zhì)生鮮奶的分為特優(yōu)級、優(yōu)級、良級和合格級四個等級,而分級的依據(jù)主要是檢測判斷鮮奶是否品質(zhì)高的4個核心指標數(shù)值,即乳脂率、乳蛋白率、菌落總數(shù)和體細胞數(shù)。在奶業(yè)發(fā)達國家的標準里,上述四個核心指標的數(shù)值基本要達到牛奶中的乳脂肪含量不低于3.3%,乳蛋白含量不低于3.0%,體細胞數(shù)不超過75萬個/ML,菌落總數(shù)不超過10萬CFU/ML。以下是使用恒溫恒濕培養(yǎng)箱測定純牛奶菌落總數(shù)的一般步驟:

       1. 取樣:取10ml純牛奶置盛有90ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1-2分鐘,制成1:10的樣品勻液。

       2. 配制濃度梯度:用1ml無菌吸管或移液槍吸取1:10樣品勻液1ml,沿管壁緩慢注于盛有9ml稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面),用漩渦震蕩器混合均勻,制成10-2的樣品勻液。按上述操作程序,制備10-3、10-4系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1ml無菌吸管或吸頭。

       3. 接種:取一定量的稀釋液,使用無菌技術(shù)將其接種到適當?shù)呐囵B(yǎng)基上。常見的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂或平板計數(shù)瓊脂。

       4. 培養(yǎng):將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫恒濕培養(yǎng)箱中,設(shè)置適宜的溫度和濕度條件。一般培養(yǎng)溫度為 37°C,培養(yǎng)時間根據(jù)培養(yǎng)基和檢測要求而定,通常為 24-48 小時。

       5. 計數(shù):培養(yǎng)結(jié)束后,觀察培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)量??梢允褂糜嫈?shù)器或手動計數(shù)方法,記錄每個稀釋度的菌落數(shù)。

       6. 計算:根據(jù)記錄的菌落數(shù),計算出原始樣品中的菌落總數(shù)。通常使用菌落計數(shù)公式進行計算,如平板計數(shù)法或稀釋倍數(shù)法。

       7. 結(jié)果報告:將計算得到的菌落總數(shù)報告為每毫升或每克樣品中的菌落數(shù)量。

      需要注意的是,在進行菌落總數(shù)測定時,要嚴格遵守無菌操作規(guī)程,以避免外部污染對結(jié)果的影響。此外,恒溫恒濕培養(yǎng)箱的條件應(yīng)根據(jù)具體的實驗要求進行設(shè)置和控制,以確保培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性和準確性。



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