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細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)為什么用5%CO2濃度?

閱讀:7263      發(fā)布時(shí)間:2017-11-9
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  二氧化碳培養(yǎng)箱:二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)飽和濕度(95%),來(lái)對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。為什么要用5%的CO2呢?因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)箱的中氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CO2。CO2既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系。動(dòng)物細(xì)胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會(huì)變酸,因此常加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個(gè)緩沖對(duì))來(lái)調(diào)節(jié)pH。NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個(gè)反應(yīng)的進(jìn)行。培養(yǎng)箱中CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應(yīng)為1.97 g/L;如果CO2濃度維持在10%,則NaHCO3的加入量應(yīng)為3.95 g/L。

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