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上海乾思生物科技有限公司

基因的克隆與表達|實驗技術服務

時間:2015-7-1閱讀:108

關鍵詞:基因的克隆與表達|實驗技術服務
簡介:世界*品牌基因的克隆與表達|實驗技術服務原裝,質(zhì)量保證,*。
基因的克隆與表達|實驗技術服務——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>從不同的重組DNA分子獲得的轉(zhuǎn)化子中鑒定出含有目的基因的轉(zhuǎn)化子即陽性克隆的過程就是篩選。目前發(fā)展起來的成熟篩選方法如下:
(一)插入失活法
外源DNA段插入到位于篩選標記基因(抗生素基因或β-半乳糖苷酶基因)的多克隆位點后,會造成標記基因失活,表現(xiàn)出轉(zhuǎn)化子相應的抗生素抗性消失或轉(zhuǎn)化子顏色改變,通過這些可以初步鑒定出轉(zhuǎn)化子是重組子或非重組子。目前常用的是β-半乳糖苷酶顯色法即藍白篩選法。
(二)PCR篩選和限制酶酶切法
提取轉(zhuǎn)化子中的重組DNA分子作模板,根據(jù)目的基因已知的兩端序列設計特異引物,通過PCR技術篩選陽性克隆。PCR法篩選出的陽性克隆,用限制性內(nèi)切酶酶切法進一步鑒定插入片段的大小。
(三)核酸分子雜交法
制備目的基因特異的核酸探針,通過核酸分子雜交法從眾多的轉(zhuǎn)化子中篩選目的克隆。目的基因特異的核酸探針可以是已獲得的部分目的基因片段,或目的基因表達蛋白的部分序列反推得到的一群寡聚核苷酸,或其它物種的同源基因。
(四)免疫學篩選法
獲得目的基因表達的蛋白抗體,就可以采用免疫學篩選法獲得目的基因克隆。這些抗體即可是從生物本身純化出目的基因表達蛋白抗體,也可從目的基因部分ORF片段克隆在表達載體中獲得表達蛋白的抗體。
奇妙的克隆克隆技術已展示出廣闊的應用前景,概括起來大致有以下四個方面:
(1)培育優(yōu)良畜種和生產(chǎn)實驗動物;
(2)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物;
(3)生產(chǎn)人胚胎干細胞用于細胞和組織替代療法;
(4)復制瀕危的動物物種,保存和傳播動物物種資源。

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