內(nèi)毒素ELISA試劑盒 注意哪些事項(xiàng)呢?

●分子實(shí)驗(yàn)中常用生化試劑原理匯總● 1．溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌體細(xì)胞壁的主要化學(xué)成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵，因而具有溶菌的作用。當(dāng)溶液中pH小于8時(shí)，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度，維持滲透壓，防止DNA受機(jī)械剪切力作用而降解。 EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金屬離子，抑制脫氧核糖核酸酶對(duì)DNA的降解作用（DNase作用時(shí)需要一定的金屬離子作輔基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因?yàn)槿芫傅姆磻?yīng)要求有較低的離子強(qiáng)度的環(huán)境。 2．NaOH－SDS液： NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是穩(wěn)定的。但當(dāng)pH＞12或pH＜3時(shí)，就會(huì)引起雙鏈之間氫鍵的解離而變性。在溶液II中的NaOH濃度為0.2mo1／L，加抽提液時(shí)，該系統(tǒng)的pH就高達(dá)12.6，因而促使染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性。 SDS：SDS是離子型表面活性劑。它主要功能有：（1）溶解細(xì)胞膜上的脂質(zhì)與蛋白，因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜。（2）解聚細(xì)胞中的核蛋白。（3）SDS能與蛋白質(zhì)結(jié)合成為R-O-SO3-…R＋-蛋白質(zhì)的復(fù)合物，使蛋白質(zhì)變性而沉淀下來(lái)。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取過(guò)程中，必須把它去除干凈，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA時(shí)）受到干擾。 3. 3mol／L NaAc（pH4.8）溶液： NaAc的水溶液呈堿性，為了調(diào)節(jié)pH至4.8，必須加入大量的冰醋酸。所以該溶液實(shí)際上是NaAc-HAc的緩沖液。用pH4.8的NaAc溶液是為了把pH12.6的抽提液，調(diào)回pH至中性，使變性的質(zhì)粒DNA能夠復(fù)性，并能穩(wěn)定存在。而高鹽的3mol／L NaAc有利于變性的大分子染色體DNA、RNA以及SDS-蛋白復(fù)合物凝聚而沉淀之。前者是因?yàn)橹泻秃怂嵘系碾姾?，減少相斥力而互相聚合，后者是因?yàn)殁c鹽與SDS－蛋白復(fù)合物作用后，能形成較小的鈉鹽形式復(fù)合物，使沉淀更*。 4．為什么用無(wú)水乙醇沉淀DNA？用無(wú)水乙醇沉淀DNA，這是實(shí)驗(yàn)中常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優(yōu)點(diǎn)是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會(huì)起任何化學(xué)反應(yīng)，對(duì)DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時(shí)，乙醇會(huì)奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般實(shí)驗(yàn)中，是加2倍體積的無(wú)水乙醇與DNA相混合，其乙醇的終含量占67％左右。因而也可改用95％乙醇來(lái)替代無(wú)水乙醇（因?yàn)闊o(wú)水乙醇的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)比95％乙醇昂貴）。但是加95％的乙醇使總體積增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA損失也增大，尤其用多次乙醇沉淀時(shí)，就會(huì)影響收得率。折中的做法是初次沉淀DNA時(shí)可用95％乙醇代替無(wú)水乙酵，后的沉淀步驟要使用無(wú)水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。

人類成纖維細(xì)胞(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌

內(nèi)毒素ELISA試劑盒

檢測(cè)范圍：歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書.
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類：進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀：盒裝液體
試劑盒保存：2-8℃低溫保存。
標(biāo)本：血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

人胚胎腸粘膜組織來(lái)源細(xì)胞

選購(gòu)要點(diǎn)：一、經(jīng)濟(jì)性對(duì)于選擇進(jìn)口品牌的試劑盒還是國(guó)產(chǎn)品牌的試劑盒，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室課題經(jīng)費(fèi)以及各品牌的產(chǎn)品質(zhì)量和美譽(yù)度來(lái)自行選擇。一般質(zhì)量可靠，文獻(xiàn)引用多。建議大家通過(guò)閱讀SCI文獻(xiàn)，了解同行所使用的品牌。但品牌由于進(jìn)口和運(yùn)輸?shù)瘸杀据^高，因此售價(jià)也較高。 二、美譽(yù)度不論選擇品牌還是國(guó)產(chǎn)品牌時(shí)，都要注意產(chǎn)品的質(zhì)量、度和美譽(yù)度。不是說(shuō)所有的國(guó)外品牌質(zhì)量都可靠，有些品牌其實(shí)是OEM貼牌的，質(zhì)量不一定有保障。還有一些公司提供的試劑盒，就更不靠譜了，相關(guān)指標(biāo)的抗體，找遍都沒(méi)有，如何開發(fā)出相應(yīng)的ELISA試劑盒呢？ 所以對(duì)于新手而言，一定要謹(jǐn)慎選擇。 三、靈敏度和檢測(cè)范圍靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的zui低限，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標(biāo)水平很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的ELISA試劑盒。如果待檢指標(biāo)的濃度高于試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的zui高值，則需要適當(dāng)倍數(shù)稀釋樣本，計(jì)算結(jié)果時(shí)，乘以相應(yīng)的系數(shù)倍數(shù)即可，如果樣本中待檢指標(biāo)含量較低，一般不建議再做稀釋。 四、重復(fù)性科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般ELISA試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。在選擇試劑盒時(shí)，要通過(guò)閱讀相應(yīng)的說(shuō)明書或電話咨詢廠家試劑盒的相關(guān)技術(shù)參數(shù)。 五、試劑盒特異性 ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分--抗體對(duì)有關(guān)，若抗體對(duì)中之一為多抗，另一個(gè)必須為單抗，建議使用雙單抗。在選擇市面上的試劑盒時(shí)，先閱讀相關(guān)產(chǎn)品的說(shuō)明書，了解試劑盒的特異性和交叉反應(yīng)性。 六、文獻(xiàn)引用選ELISA試劑盒時(shí)，SCI文獻(xiàn)的引用有參考價(jià)值。這也是業(yè)界對(duì)產(chǎn)品認(rèn)可的一個(gè)非常重要的指標(biāo)。重尤其選擇國(guó)內(nèi)品牌時(shí)，一定要多了解下該品牌的文獻(xiàn)引用情況以及在業(yè)內(nèi)的口碑。大家可以在Google scholar 里檢驗(yàn)下。也可以到一些行業(yè)論壇上去了解相關(guān)品牌的信息，如丁香通、小木蟲等。

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編輯：小檀20181019