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上海拜力生物科技有限公司

抗體定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

時間:2015-8-1閱讀:152

關(guān)鍵詞:抗體定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌抗體定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
抗體定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,承諾客戶不成功不收費(fèi)。我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒?yàn)流程:
抗體檢測服務(wù)
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))
Dot Blot(斑點(diǎn)印跡實(shí)驗(yàn))
Western Blot(免疫印跡實(shí)驗(yàn))
IHC (免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn))
抗體標(biāo)記服務(wù)
HRP(辣根過氧化物酶)
Biotin(生物素)
操作方法
⑴準(zhǔn)備好脾細(xì)胞。
⑵在50ml沉淀管中混合108脾細(xì)胞和107小鼠骨髓瘤細(xì)胞,并加入50ml2.5%FCS-1640液。
⑶室溫400g離心3min,使細(xì)胞沉淀。
⑷移去上清液。
⑸輕敲管底部,使沉淀流動,把沉淀管放于40℃水浴中,使其達(dá)融合溫度。
⑹加預(yù)熱至40℃的50%PEG0.8ml,用1ml吸管緩慢滴加,邊加邊搖沉淀管,肉眼觀察可見有顆粒出現(xiàn),滴加過程要求持續(xù)2min。
⑺加1ml1640液,邊加邊搖動,持續(xù)1min。
⑻重復(fù)⑺一次。
⑼加1ml1640液,邊加邊搖動,持續(xù)0.5min。
⑽重復(fù)⑼一次。
⑾加1640液15ml。
⑿室溫,400g離心1min,使細(xì)胞沉淀。
⒀去上清,輕敲管底部,加25ml含有HAT的*1640液。
⒁往已于前一日種有飼養(yǎng)細(xì)胞的40孔塑料培養(yǎng)盤中滴加融合的細(xì)胞液,每孔1滴(約0.05ml)。
⒂輕搖后,放入5%CO2飽和濕度的37℃溫箱中培育。
⒃第3、6、9、10日換入含HAT的*1640培養(yǎng)液。注意輕輕吸取上清液,勿將固定于孔底的細(xì)胞吸出,根據(jù)需要加入適量的飼養(yǎng)細(xì)胞。
⒄于第12、15日加入含有HAT的*1640培養(yǎng)液。在每次換液前用倒置顯微鏡觀察,大約在10天左右就可觀察到雜交瘤細(xì)胞生長出來。大多數(shù)雜交瘤細(xì)胞在10~20天內(nèi)出現(xiàn),但也有在1個月左右才能出現(xiàn)的。雜交瘤細(xì)胞出現(xiàn)后,吸取上清液,檢查抗體。
⒅對繼續(xù)生長的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行增殖傳代。在傳代過程中,依情況取消HAT液和*1640液而代之以10%FCS-1640液。同時保存于液氮和進(jìn)行克隆化,在這期間每代都要檢查抗體,以防止產(chǎn)生抗體細(xì)胞的變異和丟失。

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