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基因組DNA提取技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

時(shí)間:2015-7-1閱讀:186

關(guān)鍵詞:基因組DNA提取技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡(jiǎn)介:世界*品牌基因組DNA提取技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
基因組DNA提取技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,承諾客戶不成功不收費(fèi)。我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
DNA提取試劑盒是根據(jù)氯化芐法構(gòu)建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。氯化芐具有能將含有纖維素等的細(xì)胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細(xì)胞壁的特性。本制品利用了氯化芐的這一特性,將植物樣品凍結(jié)融解后,再使用Pipet Tip的將植物樣品在Microtube壁上數(shù)次按壓即可破壞細(xì)胞壁。
保存方式
室溫。低溫保存可能會(huì)有沉淀析出。如果發(fā)生析出現(xiàn)象,請(qǐng)于50℃溶解后,再于室溫保存。
操作方法
全套操作約需1小時(shí),分勻漿、細(xì)胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟,詳細(xì)說明如下。
一. 勻漿和細(xì)胞裂解。
使用不同的實(shí)驗(yàn)材料需采用不同的勻漿步驟,具體說明如下:
【從動(dòng)物組織中提取基因組DNA】
使用研缽進(jìn)行勻漿時(shí):
① 取1~100 mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中,快速用力展研成勻漿。
注)下列組織請(qǐng)加液氮研磨至粉末狀。
A.富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
C.富含角質(zhì)蛋白的組織或堅(jiān)硬的組織(如骨骼)等。
② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,溫和研磨30秒鐘。
注)使用上述①-注)的實(shí)驗(yàn)材料時(shí),請(qǐng)?jiān)诩尤隨olution A及RNase A1后,將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿液移至Collection Tube中。如果勻漿體積不足650 μl,請(qǐng)補(bǔ)充Solution A至650 μl,65℃保溫5分鐘。
二.使用研磨棒進(jìn)行勻漿時(shí):
① 取1~100 mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的Collection Tube 中,用研磨棒快速研磨成糊狀。
② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
③ 加入350 μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中,充分振蕩混合后,65℃保溫5分鐘。
三.使用懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞時(shí):
① 使用Collection Tube收集1×105~1.5×107的細(xì)胞懸浮液,5,000 rpm離心5分鐘,棄上清(細(xì)胞培養(yǎng)液)。
② 加入150 μl的滅菌蒸餾水或PBS懸浮細(xì)胞。
③ 加入500 μl的Solution A和0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。
四.使用貼壁細(xì)胞時(shí):
① 棄盡培養(yǎng)液,向培養(yǎng)皿中加入650 μl的Solution A,室溫靜置1分鐘。
注)96孔板等的每個(gè)孔中一次容納不了650 μl 溶液時(shí),請(qǐng)分?jǐn)?shù)次處理細(xì)胞。
② 用移液槍的槍頭吹落貼壁培養(yǎng)細(xì)胞,取650 μl的細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移至Collection Tube中。
③ 加入0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。

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