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上海拜力生物科技有限公司

多克隆抗體制備技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)

時間:2015-7-1閱讀:170

關(guān)鍵詞:多克隆抗體制備技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌多克隆抗體制備技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
多克隆抗體制備技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>血清的分離:
如果用三角瓶或平皿盛血,將器皿傾斜放置于37oC烘箱2hr,轉(zhuǎn)移到4oC沉淀,第二天早上用吸管吸取血清。如果用離心管收集,37oC烘箱放置2hr,轉(zhuǎn)移到4oC沉淀,第二天早上離心,10000RCF,10分鐘。在血清中加入 NaN3 至終濃度0.02%,分裝后-20oC保存。
抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價無明顯變化。注意避免反復(fù)凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:
1、制備抗原。
2、選擇實驗動物。
3、動物免疫。
4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
(一)抗原制備
Ig 是免疫球蛋白,對異種動物而言,是良好的抗原物質(zhì)??梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清,
經(jīng)適當提取后,產(chǎn)生抗 Ig 抗體,又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標記反應(yīng)中,均需制備
抗 Ig 抗體。
(二)材料與試劑
1.提取的動物 Ig
2.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
3.青霉素和鏈霉素
4.實驗動物 兔
5.其它材料及試劑
時間(天)    制備步驟    說明
1    初次免疫    每種抗原免疫5只Balb/c小鼠,抗原與弗氏*佐劑
14    第二次免疫    抗原與水溶性佐劑
21    第三次免疫    抗原與水溶性佐劑
28    血清效價檢測    間接ELISA檢測血清效價,效價達>1:20000;抗血清效價>1:10000再次加強一次,效價<1:10000終止合同
30    加強免疫    單獨抗原 
三天后采血(血清做陽性對照),取脾
34    細胞融合    SP2/0骨髓瘤細胞與一只小鼠(ELISA效價較高)的脾細胞融合
44-56    HAT選擇雜交瘤細胞    ELISA效價檢測篩選陽性細胞克隆(一株)
60-70    細胞上清送檢    2ml ELISA陽性細胞上清交客戶檢測,請在接到樣品后1周之內(nèi)回復(fù)
     細胞凍存    待客戶檢測結(jié)果結(jié)束,確認1株細胞株進行后續(xù)的腹水制備
     制備腹水并純化    接種細胞制備腹水及腹水純化(1株)
     zui終提供    ?2株雜交瘤細胞,T-25細胞培養(yǎng)瓶1瓶
?1株細胞Protein A/G純化抗體2mg
?完整的技術(shù)服務(wù)報告
?抗體驗收標準:免疫原檢測抗體效價 >1:50000

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