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上海拜力生物科技有限公司

單克隆抗體定制|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

時(shí)間:2015-6-2閱讀:193

關(guān)鍵詞:單克隆抗體定制|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌單克隆抗體定制|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
單克隆抗體定制|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí),我們也會(huì)提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn)。另一方面,我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒?yàn)流程:
免疫細(xì)胞化學(xué)的 技術(shù)關(guān)鍵之一是制備特異性強(qiáng)、親合力大、滴度高的特異性抗體,由于每種抗原都有幾個(gè)抗原決定簇,用它免疫動(dòng)物將產(chǎn)生對(duì)各個(gè)決定簇的抗體,即多克隆抗體。單克隆抗體則是由一個(gè)產(chǎn)生抗體的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的雜交廇細(xì)胞經(jīng)無性繁殖而來的細(xì)胞群所產(chǎn)生的,所以它的免疫球蛋白屬同一類型,質(zhì)地純一,而且它是針對(duì)某一抗原決定簇的,因此特異性強(qiáng),親合性也一致。
(一)動(dòng)物的選擇與免疫
1.動(dòng)物的選擇 純種BALB/C小鼠,較溫順,離窩的活動(dòng)范圍小,體弱,食量及排污較小,一般環(huán)境潔凈的實(shí)驗(yàn)室均能飼養(yǎng)成活。目前開展雜交瘤技術(shù)的實(shí)驗(yàn)室多選用純種BALA/C小鼠。
2.免疫方案 選擇合適的免疫方案對(duì)于細(xì)胞融合雜交的成功,獲得高質(zhì)量的McAb至關(guān)重要。一般在融合前兩個(gè)月左右根據(jù)確立免疫方案開始初次免疫,免疫方案應(yīng)根據(jù)抗原的特性不同而定。
(1)可溶性抗原免疫原性較弱,一般要加佐劑,半抗原應(yīng)先制備免疫原,再加佐劑。常用佐劑:福氏*佐劑、福氏不*佐劑。
初次免疫 抗原1~50μg加福氏*佐劑皮下多點(diǎn)注射或脾內(nèi)注射(一般0.8~1ml,0.2ml/點(diǎn))
↓3周后
第二次免疫 劑量同上,加福氏不*佐劑皮下或ip(腹腔內(nèi)注射)(ip劑量不宜超過0.5ml)
↓3周后
第三次免疫 劑量同一,不加佐劑,ip(5~7天后采血測其效價(jià))
↓2~3周
加強(qiáng)免疫,劑量50~500μg為宜,ip或iv(靜脈內(nèi)注射)
↓3天后
取脾融合
目前,用于可溶性抗原(特別是一些弱抗原)的免疫方案也不斷有所更新,如:①將可溶性抗原顆粒化或固相化,一方面增強(qiáng)了抗原的免疫原性,另一方面可降低抗原的使用量。②改變抗原注入的途徑,基礎(chǔ)免疫可直接采用脾內(nèi)注射。③使用細(xì)胞因子作為佐劑,提高機(jī)體的免疫應(yīng)答水平,增強(qiáng)免疫細(xì)胞對(duì)抗原的反應(yīng)性。
(2)顆??乖庖咝詮?qiáng),不加佐劑就可獲得很好的免疫效果。以細(xì)胞性抗原為例,免疫時(shí)要求抗原量為1~2×107個(gè)細(xì)胞。
初次免疫 1×107/0.5ml ip
↓2~3周后
第二次免疫 1×107/0.5ml ip
↓3周后
加強(qiáng)免疫(融合前三天)1×107/0.5ml ip或iv

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