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細胞凋亡發(fā)生時,內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶將分解核小體區(qū)間的雙鏈DNA,但核小體本身由于由組蛋白緊密結(jié)合而免受切割,單克隆抗體可以與核小體形成夾心結(jié)構(gòu),可通過檢測核小體判斷細胞是否經(jīng)歷凋亡事件。原理:●細胞凋亡的發(fā)生,是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp~200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法,應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu),可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。
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抗組蛋白抗體IgGELISA試劑盒,本應用試劑盒已完成多中心臨床驗證,并通過國家食藥監(jiān)總局的認證。我司通過建立覆蓋歐美的采購中心,與歐美1000多個品牌建立了正式的代理與合作,涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,具有壓倒性地優(yōu)勢。產(chǎn)品領域:分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質(zhì)學、細胞治療、臨床應用等領域。主營產(chǎn)品:流式抗體、ELISA試劑盒、標準品和對照品、生化試劑、抗體和抗原、細胞因子、技術服務、實驗耗材和消耗品、儀器設備。
●ELISA試劑盒17個操作技巧●: 1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。 3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。 4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。 5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。 6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。 7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。 8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。 9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。 10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。 11.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。 12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。 13.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。 14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。 15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。 16.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。 17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
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編輯:小檀20181009
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