氰基柱既可以用在正相模式，又可以用于反相模式。考慮到色譜柱壽命，推薦使用過程中固定為其中一種模式。因色譜柱出廠時(shí)使用庚烷：乙酸乙酯=90:10進(jìn)行質(zhì)控，所以如需要使用反相模式，請(qǐng)先使用異丙醇等將柱內(nèi)的溶劑進(jìn)行充分置換后再用相應(yīng)的流動(dòng)相進(jìn)行活化操作。

Question 3. C4 色譜柱怎么活化？

一般C4色譜柱的活化參照C18色譜柱，第一次使用色譜柱前，應(yīng)先用20倍柱體積以上的甲醇/乙腈充分活化。為確保數(shù)據(jù)的質(zhì)量，分析前應(yīng)使用至少 10 倍柱體積的流動(dòng)相平衡色譜柱。若流動(dòng)相中緩沖鹽濃度較高，為了防止鹽在色譜柱或系統(tǒng)中析出，應(yīng)先使用與流動(dòng)相構(gòu)成比例相同或有機(jī)相比例較低的水溶液沖洗至少 5 倍柱體積，再過渡到流動(dòng)相。

Question 4. ShimNex HE SAX/SCX以及WP SAX/SCX怎么沖洗？

硅膠基質(zhì)的離子交換色譜柱一般流失比較嚴(yán)重，壽命一般不是很好。所以色譜柱的清洗維護(hù)非常重要。色譜柱的污染可能會(huì)導(dǎo)致峰形的變化、峰分裂、肩峰、柱效的變化或背壓增加等問題。請(qǐng)參考以下方法進(jìn)行清洗：

0.1%乙酸(5倍柱體積)>0.3M 磷酸鹽緩沖液，含0.1%乙胺四乙酸(pH7)(20倍柱體積)>0.1%乙酸(10倍柱體積)>乙腈(5倍柱體積)>異丙醇(20倍柱體積)>乙腈(5倍柱體積)

Question 5. 硅膠基質(zhì)色譜柱的保存有什么注意事項(xiàng)？

Question 6. 氨基酸分析儀中，使用的Amino Na/Li型色譜柱，色譜柱怎么活化？

在使用長(zhǎng)期停止使用的色譜柱之前，用0.2M氫氧化鈉水溶液沖洗數(shù)小時(shí)。

Question7. 氨基酸分析儀中，使用的Shim-pack Amino Na/Li型色譜柱，色譜柱臟了的時(shí)候怎么沖洗？

進(jìn)行氨基酸分析后，首先可以選擇0.2M氫氧化鈉清洗鈉型色譜柱，用0.2M的氫氧化鋰清洗Li型色譜柱，此外還可以選擇酸性流動(dòng)相和EDTA溶液進(jìn)行清洗。

酸洗主要針對(duì)Li型以及Na型色譜柱，采用0.1M 硝酸沖洗數(shù)小時(shí)，然后使用0.2M氫氧化鈉清洗鈉型色譜柱或者0.2M的氫氧化鋰清洗Li型色譜柱幾個(gè)小時(shí)。EDTA沖洗，采用0.2M EDTA·2Na(乙二胺四乙酸二鈉鹽)水溶液以0.2m/min流過色譜柱1-2小時(shí)，用水沖洗，然后用0.2M氫氧化鋰沖洗Li型色譜柱一天，然后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

如果色譜柱沖洗后沒有改善，說明色譜柱已損壞，需要更換新的色譜柱進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

Question 8. 使用的Amino Na/Li型色譜柱，色譜柱怎么保存？

如果色譜柱超過半年不使用，建議使用以下流動(dòng)相沖洗保存：使用0.2M的氫氧化鈉（氫氧化鋰）水溶液清洗色譜柱，用0.01%的辛酸的10%乙醇溶液置換色譜柱，最后將色譜柱保存在陰暗地方。

Question 9. Shim-pack Amino系列色譜柱有什么注意事項(xiàng)？

有機(jī)相比例不高于10%，避免高溫停泵（0.1-0.3 ml/min降至室溫后再停泵）。

Question 10. Shim-pack Amino Na型和Li型色譜柱有什么區(qū)別？

Shim-pack Amino-Na：大概可分析19個(gè)化合物，一針分析時(shí)間為90分鐘，分析速度快，化合物少；

Shim-pack Amino-Li：大概可分析38個(gè)化合物，一針分析時(shí)間為180分鐘，分析速度慢，化合物多。

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關(guān)于液相色譜柱使用中的常見問題解答

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