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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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特色方案|食品中維生素B12的測(cè)定

時(shí)間:2023/7/7閱讀:712
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特色方案


食品中維生素B12的測(cè)定


維生素B12又叫鈷胺素,是含有必須礦物質(zhì)的維生素,廣泛存在于動(dòng)物食品中。維生素B12參與制造骨髓紅細(xì)胞,具有防止惡性貧血的作用。消化道疾病者容易缺乏維生素B12,應(yīng)當(dāng)注意飲食平衡,并適當(dāng)口服維生素B12予以補(bǔ)充。SHIMSEN 維生素B12免疫親和柱能夠特異地富集樣品中的維生素B12,廣泛應(yīng)用于乳制品、嬰兒配方奶粉及飲料等食品樣品的前處理步驟。

1. 提取

維生素B12標(biāo)準(zhǔn)品:

380-04112-S,Vitamin B12

維生素B12同位素內(nèi)標(biāo):

380-04412-IS,[13C7]-Vitamin B12

準(zhǔn)確稱取混合均勻的樣品2.0 g(精確至0.01g)于50 mL離心管中,加入20 mL去離子水溶液,渦旋10 min,

超聲15 min。于8000 r/min下離心10 min,移取4 mL上清液,待凈化。


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2. 凈化


SHIMSEN 維生素B12免疫親和柱,1000ng/3mL(貨號(hào):380-00930-03)

(1)活化:加壓排出免疫親和柱中的保護(hù)液,棄去流出液;

(2)上樣:準(zhǔn)確移取上清液4 mL加入免疫親和柱中,棄去流出液;

(3)清洗:當(dāng)上樣液的液面下降到免疫親和柱中的管體處時(shí)(未全流干時(shí)),向柱中加入10 mL水,棄去流出液,于負(fù)壓裝置(貨號(hào):RT-26077)中將小柱抽干;

(4)洗脫:關(guān)閉負(fù)壓裝置閥門(mén),向柱中加入2 mL甲醇,靜置2-3 min,打開(kāi)閥門(mén),收集流出液。

(5)重新溶解:向洗脫液中加入50 µL 0.1%甲酸水,于50-60℃氮吹至近干;再加入1 mL 0.1%甲酸水渦旋混勻,過(guò)0.22 µm尼龍濾膜(貨號(hào):380-00321),待檢測(cè)。

注意:

① 實(shí)驗(yàn)中應(yīng)控制柱流速不要超過(guò)1 mL/min;

② 免疫親和柱于2-8 ℃儲(chǔ)存,不可冷凍,使用前需要恢復(fù)到室溫。



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附:參考方法

食品中維生素B12的測(cè)定 參考標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.285-2022 第二法



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