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CAR-T治療從未止步

閱讀:838      發(fā)布時間:2021-5-6
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 CAR-T療法就是嵌合抗原受體T細胞免疫療法,英文全稱ChimericAntigen Receptor T-Cell Immunotherapy。其中T淋巴細(Tlymphocyte)簡稱T細胞,是由來源于骨髓的淋巴干細胞,在胸腺中分化、發(fā)育成熟后,通過淋巴和血液循環(huán)而分布到全身的免疫器官和組織中發(fā)揮免疫功能。而CAR(腫瘤嵌合抗原受體),將T細胞與CAR結合,即CAR-T細胞,利用其“定位導航裝置”CAR,專門識別體內腫瘤細胞,高效地殺滅腫瘤細胞,從而達到治療惡性腫瘤的目的。

 

正在進行“戰(zhàn)斗”的CAR-T細胞

由于CAR-T能夠定向治療疾病,又被稱作給患者“活的藥”。目前CAR-T治療只是用于少量臨床實驗和晚期血癌的患者治療。由于其它的治療方案都已經沒有辦法時,CAR-T的顯著效果這都引起研發(fā)人員和公眾的關注,這些患者中包括成人和孩子。2017年,CAR-T治療被美國FDA批準應用于孩子急性淋巴細胞白血病和成人晚期細胞癌。由于T細胞采取患者本身體內,不會產生免疫系統的抗性,因此幫忙患者進行治療疾病。

CAR-T治療流程

標準的CAR-T治療流程主要分為以下七個步驟進行(整個療程持續(xù)5周左右):

1.評估病人是否符合CAR-T治療的適應癥

2.分離T細胞:通過外周血血細胞分離機從腫瘤病人血液中分離出單個核細胞,進一步純化T細胞。

3.改造T細胞:用基因工程技術,把一個含有能識別腫瘤細胞且激活T細胞的嵌合抗原受體的病毒載體轉入T細胞,即把T細胞改造成CAR-T細胞。

4.擴增CAR-T細胞:在體外培養(yǎng)以大量擴增CAR-T細胞。一般一個病人需要幾千萬,乃至幾億個CAR-T細胞,體重越大,需要細胞越多。

5.CAR-T細胞回輸入人體:把擴增好的CAR-T細胞通過靜脈回輸到病人體內,開始進行腫瘤細胞免疫治療。

6.監(jiān)控反應:嚴密監(jiān)護病人身體反應,尤其是細胞輸入體內后一至兩周內可能發(fā)生劇烈不良反應。

7.評估治療效果:多在回輸CAR-T細胞后第15天和第30天評估對原發(fā)病的治療效果。

 

目前研究學者正在為其他類型的CAR-T治療,即通用型CAR-T細胞。在采集過程中,T細胞不是來自患者,而是取自已經治愈的患者體內。這樣就不用針對每個病例,而單獨進行培養(yǎng)各自的CAR-T細胞。通用型CAR-T療法則可以對異體T細胞進行提前制備,隨時提供給患者。此外,它也不受患者自身T細胞質量的影響。但它還是一個新興領域,人們對CAR-T細胞治療的科學認識尚有許多需要解決的問題。

相關操作

1、血液中的白細胞有五種,按照體積從小到大是:淋巴細胞,嗜堿性粒細胞,嗜中性粒細胞,嗜酸性粒細胞和單核細胞。然后采用連續(xù)或者半連續(xù)的密度梯度離心的方法,再經過磁珠法進行細胞富集。

程序控制離心機

2、通過分子生物學操作,讓質粒攜帶CAR基因,大量擴增質粒的目的是擴增CAR基因,用于轉導使用。其中質粒是細菌、放線菌等生物中染色體(或擬核)以外的DNA分子,存在于細胞質中(但酵母除外,酵母的2 μm質粒存在于細胞核中),具有自主復制能力,使其在子代細胞中也能保持恒定的拷貝數,并表達所攜帶的遺傳信息,是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA分子。

恒溫振蕩培養(yǎng)箱

3.用貼壁細胞和懸浮細胞培養(yǎng),通過病毒轉染細胞的方法生產目的病毒。

滾瓶培養(yǎng)用于貼壁細胞培養(yǎng)

培養(yǎng)箱用于懸浮細胞培養(yǎng)

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