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技術(shù)文章

全自動(dòng)組織研磨機(jī)破碎酵母細(xì)胞實(shí)驗(yàn)-上海凈信

閱讀:2251          發(fā)布時(shí)間:2017-7-21

驗(yàn)地點(diǎn):中科院生物物理所生物大分子國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

用戶(hù):常文瑞組



 

實(shí)驗(yàn)方法

1、破碎前的準(zhǔn)備:

   0.1g菌體(本實(shí)驗(yàn)以0.1g菌體為例);

   直徑3號(hào)陶瓷珠;

   研磨機(jī)(選用品牌上海凈信科技TS-24);

   預(yù)處理好的2ML研磨管;

   模塊冷凍。
 

2、研磨: 

   0.1g菌體,5000r/min離心1 min后去上清,加入等體積的玻璃珠,加入0.5ML PBS溶液,放入預(yù)先冷凍好的模塊中,放入上海凈信科技的研磨機(jī)中,調(diào)整頻率為60Hz,震蕩時(shí)間60s.

  注:破菌效率隨著液體體積的增加而增加,液體體積達(dá)到100ul時(shí)開(kāi)始達(dá)到zui大破菌效率。

  附:陶瓷珠回收,以下是方法:

      1、將含陶瓷珠的EP管,放置在大燒杯中,用自來(lái)水中浸泡2-3天。

      2、用鑷子將陶瓷珠和細(xì)胞碎片等全部抖落到燒杯中。靜置待玻璃珠沉淀后,輕輕將上面懸浮的細(xì)胞碎片倒掉,在加水重懸陶瓷珠。

      3、重復(fù)步驟2,4-5次直到所有的細(xì)胞碎片都去除干凈。

      4、加入適量的濃硝酸(將陶瓷珠全部覆蓋即可),浸泡過(guò)夜。

      5、去離子水洗三次,置烘箱中干燥即可。

 

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