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技術(shù)文章

組織研磨機(jī)對擬南芥或水稻穗RNA的快速提取步驟

閱讀:3296          發(fā)布時(shí)間:2017-1-3

組織研磨機(jī)對擬南芥或水稻穗RNA的快速提取步驟


實(shí)驗(yàn)步驟

方法1  濕磨法

1.取打碎機(jī)適配器于-80°冷凍約15min。

2.取一指節(jié)長度的花序,帶上一片葉子,(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入國產(chǎn)2ml EP管中,加一粒鋼珠,液氮速凍。之后用鑷子取出,快速加入適配器中。(用國產(chǎn)的EP管即可,進(jìn)口的管子液氮凍過后,容易裂)

3.打碎15s,10單位頻振。(水稻嫩葉為。45S,12單位頻振 老葉為,70S   12單位頻振 )

4.將材料再次放入液氮中。

5.用磁鐵吸出鋼珠,加入1研磨單位Trizol,余下步驟即正常的RNA提取步驟。

 

方法2  干磨法

1.取一指節(jié)長度的花序(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入國產(chǎn)2研磨單位EP管中,加一粒鋼珠,400ul Trizol。

2.打碎1min 10單位頻振(水稻嫩葉為。45S,2單位頻振   老葉為,70S   2單位頻振 ) 。

3.吸出鋼珠,補(bǔ)0.12mlTrizol。

4.余下步驟即正常的RNA提取步驟。

 

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