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HES分離紅細胞
閱讀：3130發(fā)布時間：2015-4-22
HES分離紅細胞
HES是從支鏈淀粉衍生出來的，是富含淀粉的復合物，其生理和化學特性主要由取代級、平均分子量決定。大量實驗表明平均分子量越大對紅細胞的凝集作用越強，有效提高血細胞的沉降速度，從而使血細胞與其它細胞分離。故而，使用HES沉淀法是一種的細胞分離方法。
間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 是指一群可向成骨細胞、成脂、肪胞、骨髓基質(zhì)細胞、肝臟細胞、心肌細胞和神經(jīng)細胞等多種細胞分化的多潛能組織干細胞,是在細胞治療、基因治療中有效發(fā)揮作用的理想工程細胞。 MSCs不僅存在于骨髓,也可從臍血、外周血中以及脂肪組織、肌肉、胎兒器官、大腦、牙齒中分離。UCB - MSCs的分離、篩選、增殖、分化與臍血樣本的選擇、培養(yǎng)基的差異以及分離、擴增分化過程中操作技術(shù)等多種因素有關(guān)。目前用于UCB - MSCs分離的方法有:貼壁篩選法、密度梯度離心法、流式細胞儀法和免疫磁珠法。流式細胞儀法對細胞損傷較大，免疫磁珠法價格相對較貴且由于抗原抗體反應也容易改變細胞原有特性，而HES聯(lián)合密度梯度離心法常與貼壁篩選法結(jié)合使用,可提高所得UCB - MSCs的純度，目前研究多采用此法。國內(nèi)不少學者采用HES沉淀紅細胞，然后再進行離心分離單個核細胞，也取得不錯結(jié)果。實驗證明采用隨機數(shù)字表法，將每份臍血隨機分入兩個不同處理組，從而將臍血樣本的個體差異減小到zui小程度。結(jié)果證實，HES聯(lián)合密度梯度離心法獲得的有核細胞數(shù)量明顯多于FICOLL密度梯度離心法。
HES分子處在紅細胞之間聯(lián)接而成,同時還阻礙白細胞和內(nèi)皮細胞的黏附，并使平均血小板容積呈現(xiàn)微弱地降低，從而有輕度抑制血小板集聚的功能。臍血經(jīng)HES處理后，可使紅細胞沉積至試管底，對其它主要成分包括單個核細胞無影響。經(jīng)這樣處理后，實驗時間相對較短，步驟相對較少，細胞污染幾率小，從而使細胞數(shù)損失較少。結(jié)論證明，與相應的干細胞分離液聯(lián)合分離使用HES沉淀法是一種的臍血單個核細胞分離方法。
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