 | 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 |
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NK細(xì)胞活化擴(kuò)增方法，Corning版
閱讀：2469發(fā)布時(shí)間：2018-2-8
NK 細(xì)胞活化
- 熱滅活自體血漿，56°C，30min。離心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血漿，培養(yǎng)備用。
- 至少5倍體積的PBS（不含鈣鎂）清洗PBMCs。室溫離心500xg，10min，收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培養(yǎng)基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
- 預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶使用前，用PBS（不含鈣鎂）清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶，37°C，5% CO2培養(yǎng)。
注意：第六天之前，如果培養(yǎng)基變黃，細(xì)胞密度超過(guò)2.0 x 106 cells/mL，需要添加新鮮的NK活化培養(yǎng)基配比10%自體血漿，保持細(xì)胞密度在在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之間。
NK細(xì)胞擴(kuò)增
- 培養(yǎng)第六天，培養(yǎng)液離心，適量NK擴(kuò)增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）重懸細(xì)胞，再轉(zhuǎn)移到T-225培養(yǎng)瓶或透氣細(xì)胞培養(yǎng)袋。
- 每隔兩三天，根據(jù)細(xì)胞擴(kuò)增狀態(tài)，培養(yǎng)體系中添加新鮮的NK擴(kuò)增培養(yǎng)基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）保持細(xì)胞密度在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之間。
- 細(xì)胞總量到達(dá)2 x 109 后收獲細(xì)胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測(cè)。
注意：整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，細(xì)胞懸液吹打和培養(yǎng)容器拍打都要輕柔，以避免細(xì)胞損傷，保持細(xì)胞活性。
Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝
英文名：Corning® NK Expansion Kit
中文名：Corning® NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)套裝
應(yīng)用：NK細(xì)胞活化擴(kuò)增
品牌產(chǎn)地：美國(guó)Corning
保存：2°C - 8°C
NK細(xì)胞是當(dāng)今免疫治療常用的細(xì)胞。但是NK細(xì)胞培養(yǎng)操作難度大，對(duì)培養(yǎng)條件、培養(yǎng)技術(shù)要求很高，難以獲得高純度能的活性細(xì)胞。 Corning NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)基套裝由多個(gè)組分組成，為 NK細(xì)胞培養(yǎng)提供簡(jiǎn)便的操作方案。使用該套裝所獲得細(xì)胞數(shù)量產(chǎn)量高，活性高，具有很高的殺傷效應(yīng)。
產(chǎn)品組成
NK細(xì)胞活化培養(yǎng)基
NK細(xì)胞活化添加劑
NK細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基
抗體預(yù)包被T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞培養(yǎng)袋
產(chǎn)品特色
擴(kuò)增能力強(qiáng)，在14天內(nèi)可達(dá)到100倍擴(kuò)增
效應(yīng)細(xì)胞比例高，可達(dá)80％
操作方便
產(chǎn)品訂購(gòu)信息
品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
Corning | 88-570-kit | NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)基套裝 | 1Kit |
套裝包含 | 活化用 | Pre-coated T-75 flask 抗體預(yù)包被T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 1瓶 |
NK primary medium NK細(xì)胞活化培養(yǎng)基 | 1×50 mL | ||
NK primary supplement NK細(xì)胞活化添加劑 | 1×1.8 mL | ||
擴(kuò)增用 | Expansion medium NK細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基 | 1×1000 mL | |
配件 | 細(xì)胞培養(yǎng)袋 | 1 x 640 cm2 |
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