ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒，是現(xiàn)在很多生物制藥廠和醫(yī)療實驗室常用的檢測設備，主要的試驗方法就是酶聯(lián)免疫吸附方法。
ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶標記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應的特異性，也不改變酶本身的活性。因為ELISA試劑盒價格低廉且準確性搞、反應時間短等優(yōu)點，所以適合大批量的檢測，一般常常用于食品安全檢測方面。
ELISA試劑盒17個相關操作技巧如下:
1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15～30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
16.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
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