久久久久亚洲精品男人的天堂,日本韩国男男作爱GAYWWW,特黄AAAAAAA片免费视频,av天堂电影网

您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

| 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

4006091615

technology

首頁   >>   技術(shù)文章   >>   蛋白質(zhì)印跡法實(shí)驗(yàn)的要點(diǎn)

北京誠驛恒儀科技有限公司

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務(wù)

蛋白質(zhì)印跡法實(shí)驗(yàn)的要點(diǎn)

閱讀:2644      發(fā)布時間:2020-1-2
分享:

  蛋白質(zhì)印跡法是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。

  蛋白質(zhì)印跡法(免疫印跡試驗(yàn))即Western Blot,其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。

  實(shí)驗(yàn)的要點(diǎn)

  1、樣品質(zhì)量。所抽取樣品的蛋白含量,蛋白變性是否充分等等,還有,蛋白樣品的PH值是否在7~8之間。這會直接影響到樣品濃縮的效果。此外,蛋白樣品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都會對終結(jié)果的可靠性有影響。

  2、凝膠質(zhì)量。不連續(xù)SDS-PAGE膠對凝膠的要求較高,分離膠的PH值應(yīng)在8.8左右,而濃縮膠的PH應(yīng)在6.8左右,不要差過0.5個PH單位,因?yàn)檫@個PH條件是保證電泳液中的甘氨酸不電離的必要條件,也是保證能充分壓縮樣品的前提。因此,制備凝膠的時候所用Tris-HCl緩沖液的PH值是否穩(wěn)定是很重要的。

  3、點(diǎn)樣。樣品盡量不要與電泳液混合,這樣能提高濃縮的效果,因?yàn)殡娪疽篜H值為8.3,而樣品為7.5,混合后會影響到樣品的PH值,進(jìn)而影響濃縮效果。

  4、電泳緩沖液。盡量用新鮮配制的。這樣能保證PH值和離子強(qiáng)度的穩(wěn)定。

  5、電壓條件。我們經(jīng)常用的濃縮時80V,分離時100V比較好,條帶很平。

  6、轉(zhuǎn)膜。膜的選擇主要從實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)要求來考慮。例如,要做分子量小于20kD的小蛋白,0.45μm的NC膜是不可取的,因?yàn)檫@樣可能會使得蛋白因透過膜孔而造成膜結(jié)合的目的蛋白量不確定,從而影響到終結(jié)果的可靠性。而如果所分離的蛋白需要進(jìn)行測序,則非PVDF膜不可,因?yàn)橹挥蠵VDF膜才能經(jīng)受住嚴(yán)酷的清洗條件。

  7、抗體雜交與底物顯色。一抗盡量選擇小鼠或者兔來源的單克隆抗體,還有要注意所用的抗體是否能夠識別變性條件下的目標(biāo)蛋白;二抗一般都是效價很高的,只要室溫下雜交1小時就可以了,適當(dāng)延長也是可以的。另外,要選擇靈敏度較高的化學(xué)反應(yīng)底物。如超敏型ECL發(fā)光液Enlight-Plus,檢測級別可達(dá)pg級,發(fā)光時間長,穩(wěn)定。

 

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言
香蕉视频官网| 一区二三区国产好的精华液O| 亚洲性爱视频一区二区三区| 国产H视频在线观看| 久久精品国产亚洲av高| 擦老太BBB擦BBB擦BBB擦| 无码国产69精品久久久久网站| 久久99久久99小草精品免视看| 午夜电影在线观看| 国产亚洲福利精品一区二区| 精品日韩一区二区三区| 情人伊人久久综合亚洲| 下面一进一出好爽视频| 久久精品女人毛片国产| 亚洲无线观看| 国产亚洲欧美夫妻一区| 亚州福利视频| 好爽别插了无码视频| 熟女少妇欧美激情亚洲视频| 亚洲男人天堂久久| 韩国年轻的妈妈相亲高清视频| 越南女子杂交内射BBWXZ| 强行糟蹋人妻hd中文字幕| 人妻少妇啊灬啊灬用力啊快| 久久国产劲爆AV内射—百度| 破了亲妺妺的处免费视频国产| 中文字幕日韩一区二区三区不卡| 午夜无码片在线观看影院| 真实国产乱子伦视频| 欧美人与性动交CCOO| 国产精品视频白浆免费视频| 无码人妻丰满熟妇区BBBBXXXX| 免费观看黄网站| 欧美午夜精品久久久久久浪潮| 无码人妻一区二区三区在线| 射死你天天日| 波多野42部无码喷潮在线| WWW内射国产在线观看| 天天干天天射天天操| CHINESE性内射高清国产| 厨房掀起馊子裙子挺进去视频|