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DiI現(xiàn)貨供應, 細胞膜橙紅色熒光探針現(xiàn)貨供應

時間:2018-3-13閱讀:1341
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DiI現(xiàn)貨供應, 細胞膜橙紅色熒光探針現(xiàn)貨供應

產(chǎn)品描述

DiI是一親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構,進入細胞膜后,DiI在整個細胞膜上擴散,*濃度時可以使整個細胞膜染色。DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光,具有很高的淬滅常數(shù),中等強度的光量子和很短的激發(fā)態(tài)壽命??梢杂脴藴实?/span>TRITC濾光片檢測。

DiI通常不會明顯影響細胞的生存力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑long-term tracer。除了zui簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移,通過FRAPFluorescence Recovery After Photobleaching檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。

產(chǎn)品性質(zhì)

英文別名(English Synonym

DiIC18(3); DiI perchlorate; 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate

CAS NO.CAS 號)

41085-99-8

分子式(Molecular Fomular

C59H97ClN2O4

分子量(Molecular Weight

933.87

外觀(Appearance

紅色至暗紅色,紫色至深紫色粉末

Ex/Em

550/567 nm

推薦濾光器(Filter

XF32-Omega, 31002-Chroma

純度(Purity

98%TLC

溶解性(Solubility

溶于DMF,DMSO,甲醇

結構式(Structure

運輸與保存方法

冰袋(wet ice)運輸。產(chǎn)品4ºC干燥避光保存,有效期一年。

注意事項

1) 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

2) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

DiI現(xiàn)貨供應, 細胞膜橙紅色熒光探針現(xiàn)貨供應

使用方法

1. 染色液制備

(1)配置DMSO或EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~5 mM。

未使用的儲存液分裝儲存在-20,避免反復凍融。

(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5 μM的工作液。

工作液zui終濃度建議根據(jù)不同細胞和實驗體系優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開始*濃度的摸索。

2. 懸浮細胞染色

(1)加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。

(2)37 ℃孵育細胞 2~20min,不同的細胞*培養(yǎng)時間不同。可以20min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標記結果。

(3)孵育結束,按1000~1500 rpm離心5min。

(4)傾倒上清液,再次緩慢加入37℃預熱生長培養(yǎng)液重懸細胞

(5)重復(3),(4)步驟兩次以上。

3. 貼壁細胞的染色

(1)將貼壁細胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。

(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

(4)37 ℃孵育細胞 2~20min,不同的細胞*培養(yǎng)時間不同。可以20min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標記結果。

(5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3,每次用預溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞,孵育5~10min,然后吸干培養(yǎng)基。

4. 顯微鏡檢測

(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。

(2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設定:

a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

5. 流式細胞儀檢測

經(jīng)DiO,DiI,DiD和DiR染色的細胞可分別用流式細胞儀FL1,F(xiàn)L2,F(xiàn)L3或FL4通道檢測。

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