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人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)實驗操作步驟

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人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM) 酶聯(lián)免疫分析試劑盒

實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)水平。用純化的人血栓調(diào)
節(jié)蛋白(TM)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入人血栓調(diào)節(jié)蛋
白(TM),再與HRP 標記的血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,
經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下
轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm
波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)濃度。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標
3
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度。
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
 
 

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