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上海信帆生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第13年

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ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)影響因素

時(shí)間:2013/12/13閱讀:1394
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酶聯(lián)免疫(EIJISA)是目前檢驗(yàn)科常用的免疫學(xué)檢測(cè)方法之一,其操作簡(jiǎn)單,無(wú)須特殊設(shè)備,使其在各級(jí)醫(yī)院都有應(yīng)用。

  但是,如果忽視了影響其結(jié)果的因素,難免會(huì)造成假陰性或假陽(yáng)性,因此,了解影響實(shí)驗(yàn)的因素,減少差錯(cuò)事故的發(fā)生是極其必要的。

  1實(shí)驗(yàn)室操作人員的素質(zhì)因素

  實(shí)驗(yàn)室人員的素質(zhì)主要包括五個(gè)方面:思想素質(zhì)、文化素質(zhì)、技術(shù)素質(zhì)、心理素質(zhì)、身體素質(zhì)。首先應(yīng)具備一個(gè)良好的思想素質(zhì),因?yàn)槲覀兊姆?wù)對(duì)象是人,我們的道德水平直接關(guān)系到人們的健康和生命安危,如果馬馬虎虎。三心二意,難免會(huì)有差錯(cuò)事故發(fā)生,我們應(yīng)該熱愛(ài)專業(yè),耐心細(xì)致。在工作中如標(biāo)本混淆、張冠李戴、報(bào)告單發(fā)錯(cuò)等都有可能造成嚴(yán)重后果;其次文化素質(zhì)和技術(shù)素質(zhì),我們要熟練掌握本專業(yè)的基本理論和基本技術(shù),認(rèn)真學(xué)習(xí)新理論新知識(shí),努力提高自己的業(yè)務(wù)水平,創(chuàng)造一個(gè)能夠勝任本職工作的技術(shù)平臺(tái)。良好的心理素質(zhì)就是要勇于面對(duì)工作生活中的挫折,在繁忙工作中,有條不紊,冷靜沉著的處理有關(guān)事務(wù)。人員素質(zhì)問(wèn)題是影響檢驗(yàn)結(jié)果的首要因素。

  2 標(biāo)本處理因素

  實(shí)驗(yàn)室人員收到標(biāo)本后應(yīng)認(rèn)真查對(duì),對(duì)不符合要求的標(biāo)本和申請(qǐng)單要拘收,合格標(biāo)本要及時(shí)分離血清,避免溶血,提取血清時(shí)不應(yīng)混有大量纖維蛋白或細(xì)胞成分。對(duì)不能及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本要妥善保存于4℃冰箱,做好原始記錄,標(biāo)本管上標(biāo)上待檢者姓名、日期。從冰箱取出的標(biāo)本要預(yù)溫至室溫,對(duì)冰凍的樣品要融化好,并充分混勻再用。

  3 操作過(guò)程的影響因素

  3.1 操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。

  3.2 正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。

  3.3 手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流,造成孔問(wèn)污染,導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。

  3.4 要保證加液量一致 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯(cuò)誤。

  3.5 顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過(guò)多,以免顯色過(guò)強(qiáng)。

  4 試劑的影響因素

  應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào),質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在使用時(shí)先平衡至室溫,不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉使用。試劑開(kāi)啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先檢查是否變質(zhì),,顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。

  過(guò)期的試劑不宜再用,若別無(wú)選擇,應(yīng)做好雙份質(zhì)控品的監(jiān)測(cè),確保結(jié)果的可靠性。

  5 采取措施,避免差錯(cuò)事故的發(fā)生

 

  創(chuàng)造一個(gè)良好的工作環(huán)境,實(shí)驗(yàn)窄工作人員應(yīng)團(tuán)結(jié)友愛(ài),相互關(guān)心,相互學(xué)習(xí),處在一個(gè)融洽和諧的氛圍中,自然心情舒暢,工作情緒高漲。再就是建立完善的質(zhì)量保證體系,以書(shū)面的形式發(fā)給沒(méi)位成員以及研究科室,做到人人熟悉人人重視影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素,并在操作過(guò)程中時(shí)刻注意,將質(zhì)控貫穿到整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,包括待檢者的準(zhǔn)備、標(biāo)本的采集與處理、操作過(guò)程、檢驗(yàn)結(jié)果的審核、結(jié)果的登記與保存、報(bào)告單的發(fā)放等一系列的制度,用制度管人,明確責(zé)任,錯(cuò)誤的結(jié)果還是能夠避免發(fā)生的。

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