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如何用ELISA試劑盒檢測硫磷殘留

時間:2013/9/26閱讀:1154
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通過制備對硫磷的特異性抗體,建立了蔬菜中對硫磷殘留的酶聯(lián)免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)。先將對硫磷苯環(huán)上的硝基還原為氨基,然后采用重氮化法將氨基-對硫磷與牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)相偶聯(lián),分別合成了免疫原和包被抗原:氨基對硫磷-BSA、氨基對硫磷-OVA。對合成的抗原進行紫外可見掃描,確證偶聯(lián)成功。用免疫原免疫新西蘭大耳白兔,制得對硫磷抗血清,測得其效價為1:2000,用飽和硫酸銨沉淀法得到純化抗體,與其它類似物的交叉反應為甲基對硫磷:1.22%,毒死蜱:0.09%,殺螟松:0.06%,標準曲線的線性范圍為5-1000ng/mL。用此血清建立的ELISA方法檢測蔬菜樣品(小白菜、豆角、辣椒)中添加的對硫磷標準樣品,平均回收率為96.52%,與GC方法的相關性很高,準確性大大高于酶抑制法,整個測定大約在(不包括包被時間)1.5h內完成。

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