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線性PEI轉染試劑 聚乙烯亞胺 MW25000
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 產品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產商 廠商性質
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):4678更新時間:2025-02-07 13:54:27

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產品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1g
貨號 40815ES03 應用領域 生物產業(yè)
線性PEI轉染試劑 聚乙烯亞胺 MW25000即PEI 25K是一種瞬時轉染試劑,其功能強大且經(jīng)濟實惠,在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中,能在96孔板至100L生物反應器范圍內提供始終如一高效的基因表達。因此越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉染試劑,以獲得他們所需要的優(yōu)勢,相較于其他類型轉染試劑,使用自行制備的PEI轉染試劑可以使總轉染成本降低高達40%左右。
產品介紹

Polyethylenimine, Linear, MW 25000, Transfection Grade (PEI 25000)

線性PEI轉染試劑 聚乙烯亞胺 MW25000


產品描述
 

線性PEI轉染試劑 聚乙烯亞胺 MW25000是一種高電荷陽離子聚合物非常容易結合帶負電荷的核酸分子,形成復合物,并使該復合物進入細胞中。該轉染試劑是一種瞬時轉染試劑,細胞毒性低,轉染效率高,在HEK293和CHO等細胞中基因表達效率較高。目前已經(jīng)驗證線性PEI轉染試劑廣泛適用于多種細胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela細胞等。該試劑與含血清的培養(yǎng)基兼容,能高效的將核酸導入細胞。


產品性質
 

中文名(Chinese Name

線性聚乙烯亞胺PEI 25000

英文名(English Name

Polyethylenimine Linear (PEI) MW25000 

CAS號(CAS No.)

9002-98-6, 26913-06-4

分子式(Molecular formula)

(CH2CH2NH)n

分子量(Molecular weight)

25,000

外觀(Appearance)

白色至黃色固體

熔點(Melting Point)

73~75 ℃

溶解性(Solubility)

溶于熱水,低pH冷水,甲醇和乙醇。不溶于苯和丙酮

結構式(Structure)

圖片.png
 


運輸與保存方法
 

運輸方式:室溫運輸。
保存方式:粉末在室溫或4 oC保存有效期2年。儲存液-20 °C保存,有效期1年;4 °C保存,有效期2周。不可重新凍存。


注意事項
 

1)配置好的PEI溶液從-20 oC拿出融化后,可放在oC冰箱保存,絕不可重新凍存。

2)對大多數(shù)細胞來而言,每1 μg DNA 使用 3.0 μL PEI轉染試劑都能獲得較高轉染效率。也可嘗試每1 μg DNA使用1.5~4 μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。

3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套及通風櫥操作。

4)本產品僅用于科研用途,不可用于人體。


儲存液配置(1 mg/mL)
 

1.材料

PEI 25000、Milli-Q® 水/注射用水(WFI)或類似的生物級水、12 mol/L鹽酸(HCl)、10 mol/L氫氧化鈉(NaOH)、一次性0.1~0.2 μm PES真空無菌過濾器、無菌HDPE或聚丙烯儲存瓶。

2. 配置儲存液(1 mg/mL)

1)于1 L玻璃燒杯,將1g PEI 25000粉末加入900 mL Milli-Q®超純水或其他相當級別的生物用水中,在磁子攪拌器上攪拌均勻,產生小渦。

2)邊攪拌邊滴加入鹽酸(12 mol/L)調節(jié)pH,直至pH<2.0。

3)蓋上燒杯頂部并攪拌3小時至溶解;整個過程要保持pH<2.0。

【注】:可能會存在一些小纖維狀顆粒不能溶解,這是正常現(xiàn)象。

4)邊攪拌邊滴加入NaOH(10 mol/L)調節(jié)pH,直至到6.9 ~7.1。

5)將溶液轉入量筒內,并加水定容到1 L。

6)用一次性0.1~0.2 µm PES真空過濾器過濾除菌,即得到1 mg/mL的儲存液。

7)根據(jù)需要分裝并儲存在-20 °C,1年穩(wěn)定。

【注】:儲存液再次融化后,可置于4 °C保存,2周穩(wěn)定,但絕不可重新凍存。


轉染操作流程(以6孔板為例)
 

1.接種細胞:為了提高轉染效率,建議在轉染前一天接種細胞,以轉染時細胞密度在 70%~80%為宜。

2.準備DNA-PEI復合物:按照以下體系配制DNA-PEI核酸-轉染試劑復合物: 

1)對于每孔細胞,使用100 μL無血清培養(yǎng)基稀釋2 μg目的DNA ,充分混勻 DNA稀釋液。

【注】:無血清稀釋液建議采用 Opti-MEM或ddH2O

2)立刻向100 μL的DNA稀釋液中加入5 μL的PEI 25000轉染試劑,旋渦10秒,充分混勻。

3)在室溫下孵育10~25 min,使得形成DNA-PEI陽離子核酸轉染試劑復合物。

3.轉染細胞:

1)在形成復合物過程中,移除細胞生長培養(yǎng)基,每孔中加入2 mL新鮮預熱的培養(yǎng)基。

2)直接將100 μL DNA-PEI核酸-PEI復合物加入細胞中,搖動培養(yǎng)板,輕輕混勻。

3)37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),轉染后最快h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。

4.穩(wěn)轉篩選(可選)

轉染 24 h 后,將細胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中(將細胞稀釋10倍以上),37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱孵育過夜。第二天加入與轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。
不同細胞培養(yǎng)容器轉染用量(僅供參考):

培養(yǎng)皿

表面積(cm2

DNA的量(μg)

轉染試劑的量μL

稀釋液體積μL

培養(yǎng)基總量

96孔板

0.3

0.1

0.1

10

100 μL

48孔板

0.7

0.2

0.3

20

200 μL

24孔板

1.9

0.5

1

50

500 μL

12孔板

3.8

1

2

50

1mL

6孔板

10

2

4

100

2 mL

25cm2培養(yǎng)瓶

21

4

8

200

4 mL

75cm2培養(yǎng)瓶

58

10

20

500

10 mL


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名稱

貨號

規(guī)格

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