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的納米孔測(cè)序技術(shù)

閱讀:4252      發(fā)布時(shí)間:2012-3-28
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近年來,激烈的競爭使得DNA測(cè)序技術(shù)迅猛發(fā)展。現(xiàn)在,一種叫做納米孔測(cè)序的技術(shù)猶如一匹黑馬闖入大家的視線,看起來很有潛力在競爭中拔得*。研究人員證明,他們可以在DNA鏈通過一個(gè)微小的孔時(shí)連續(xù)地讀出DNA的各個(gè)“化學(xué)字母”,這為研發(fā)解碼DNA就如同播音員閱讀自動(dòng)收?qǐng)?bào)機(jī)紙條般的測(cè)序儀鋪平了道路。這種的技術(shù)有可能將完整測(cè)出人類基因組的費(fèi)用降低到1000美元以下,為個(gè)體化醫(yī)療帶來革命。 將基于遺傳學(xué)的診療及醫(yī)學(xué)帶入新的時(shí)代。

大多數(shù)的測(cè)序工作需要耗時(shí)數(shù)天。測(cè)序儀對(duì)DNA雙鏈進(jìn)行復(fù)制,并利用熒光標(biāo)記及其他成分進(jìn)行修飾,從而對(duì)DNA鏈的堿基組成進(jìn)行讀取。納米孔測(cè)序技術(shù)則無需這些額外的步驟,直接對(duì)未經(jīng)修飾的DNA鏈進(jìn)行讀取,從而有可能成為市面上快、便宜的測(cè)序技術(shù)。

這個(gè)想法—使DNA鏈通過小孔并然后讀取其堿基—初是在1996年由麻省及加州的研究人員提出來的。后來,科學(xué)家們解決了如何利用電荷使DNA通過嵌入在在薄膜上的帶小孔蛋白質(zhì)。當(dāng)DNA堿基通過孔時(shí),它們使電荷發(fā)生變化。靈敏的電子設(shè)備檢測(cè)到這些變變化從而鑒定所通過的堿基。

不過,存在的一個(gè)主要的問題是,當(dāng)薄膜施加電壓后,DNA通過納米孔的速度過快而難以對(duì)序列上的堿基進(jìn)行讀取。兩年前,加州大學(xué)的Mark Akeson和同事們偶然發(fā)現(xiàn)了一個(gè)可能的解決方案。他們將一種叫做phi29的蛋白質(zhì)添加到納米孔裝置中。這種蛋白質(zhì)在DNA運(yùn)動(dòng)通過納米孔時(shí)可與DNA形成松散的結(jié)合,從而使DNA的運(yùn)動(dòng)速度慢了下來。

近,華盛頓大學(xué)的物理學(xué)家Jens Gundlach所的一個(gè)研究團(tuán)隊(duì)在Nature Biotechnology上報(bào)道稱,他們將Akeson的phi29蛋白整合至他們的納米孔設(shè)備,這種納米孔設(shè)備使用了一種不同的孔蛋白,可更快速地鑒定四種堿基。Phi29蛋白使DNA速度下降,使得每秒通過納米孔的核酸堿基數(shù)為20至30個(gè),從而有可能對(duì)每一個(gè)經(jīng)過納米孔的堿基進(jìn)行識(shí)別。“這是納米孔測(cè)序的獨(dú)門絕技” Gundlach說。

該技術(shù)將加劇與另外一家叫做Oxford Nanopore Technologies公司的納米孔測(cè)序技術(shù)的競爭。在2月份,Oxford Nanopore Technologies公司宣稱,他們可以對(duì)通過一個(gè)單獨(dú)納米孔的DNA鏈進(jìn)行完整的測(cè)序,并且有可能在2013年早期發(fā)售可同時(shí)運(yùn)行數(shù)千個(gè)納米孔的測(cè)序儀,從而有可能將全基因組測(cè)序時(shí)間縮短到15分鐘,費(fèi)用降到1000美元左右。

大多數(shù)的科學(xué)家認(rèn)為,如果消息不假,這個(gè)技術(shù)則確實(shí)是個(gè)了不起的。不過他們?nèi)耘f在等待證明。“Oxford Nanopore首先發(fā)出了宣告,但是由于沒有公布足夠數(shù)據(jù)而受到嚴(yán)厲批評(píng),”圣地亞哥的Electronic BioSciences公司總裁、化學(xué)家Geoffrey Barrall說。相反,Barrall說,Gundlach和同事們的成果看起來很有說服力。“這是*篇真正進(jìn)行了DNA測(cè)序的文章。

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