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1、加水：先將排水閥關(guān)閉，調(diào)整總閥至“全排”。然后，開啟進(jìn)水閥，放蒸餾水至蒸汽發(fā)生器內(nèi)，待水進(jìn)至距水表頂端大約 1～2cm 處時(shí)，關(guān)閉進(jìn)水閥，并將總閥調(diào)至“關(guān)閉”。

2、裝鍋：將待滅菌物品裝入鍋內(nèi)，注意不要塞得過緊過滿，盛有培養(yǎng)基的三角瓶和試管應(yīng)立放或適度傾斜．以免滅菌過程中培養(yǎng)基污染棉塞。

3、關(guān)門：按順時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)緊鎖手柄至紅箭頭處，使撐擋進(jìn)入門圈內(nèi)。然后旋動(dòng)八角轉(zhuǎn)盤，使門和墊圈密合，以滅菌時(shí)不漏氣為度，不宜太緊，以免損壞墊圈。

4、通電加溫：待電源控制開關(guān)的旋鈕旋至“開”處，電源指示燈亮，表示已通電，然后再按滅菌物品所需滅菌汽壓將旋切旋至 0.07MPa、 0.1mPa 或 0.14MPs 處。此時(shí)電熱指示燈亮，表示已通電加熱。

5、保溫保壓：當(dāng)蒸汽套層內(nèi)的蒸汽隨加熱達(dá)到自動(dòng)控制壓力時(shí)，電熱指示燈會(huì)白動(dòng)熄滅，表示停止加熱。隨著熱力散發(fā)壓力降低，電熱指示燈再亮，表示繼續(xù)加熱，這表明壓力控制器工作正常。當(dāng)套層內(nèi)的蒸汽加熱到所選擇的控制壓力時(shí)，即可將套層內(nèi)的蒸汽導(dǎo)入消毒室進(jìn)行滅菌。此時(shí)應(yīng)先將汽液分離器前的冷凝閥開放少許，然后將總閥調(diào)至“消毒”，套層內(nèi)的蒸汽即通過總閥進(jìn)入消毒室進(jìn)行消毒，冷凝水則通過汽液分離器自動(dòng)排出。這時(shí)蒸汽套層內(nèi)蒸汽壓力迅速下降，而消毒室內(nèi)的蒸汽壓力逐漸上升，消毒室內(nèi)的溫度表也隨著物品被蒸汽加熱而上升。當(dāng)表的溫度升到所需消毒溫度 （ 一般為 121 ℃ ） 時(shí)，開始計(jì)算滅菌時(shí)間，維持溫度至滅菌完畢。

6、出鍋：滅菌完畢后，立即切斷電源，按滅菌物品性質(zhì)和要求，決定消毒室內(nèi)的蒸汽是自然冷卻還是采取“慢排”或“快排”，例如，器械、器皿、固體曲料、土壤、草炭等不致因壓力驟然下降而受影響的物品，可直接將總閥調(diào)至“慢排”和“快排”，使消毒室內(nèi)蒸汽迅速排出。當(dāng)消毒室內(nèi)壓力下降至“0” 時(shí)，方可緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)鍋門轉(zhuǎn)盤并撥動(dòng)緊鎖手柄將門開啟 5～10 cm 。 20～30min 后將滅菌物品取出，此時(shí)滅菌物品即較干燥。溶液及培養(yǎng)基等物品滅菌完畢時(shí)，只能將總閥調(diào)至“慢排”，使消毒室內(nèi)蒸汽慢慢排出，以免突然降低壓力導(dǎo)致培養(yǎng)基劇烈沸騰。也可在滅菌完畢后，關(guān)閉總閥，讓滅菌物品自然冷卻。消毒寶壓力表降至“0” 時(shí)、再將總閥調(diào)至“慢排”數(shù)分鐘取出滅菌物品。

7、連續(xù)操作：如滅菌物品較多需連續(xù)操作時(shí)，應(yīng)先檢查水位。有足夠水量時(shí)，可連續(xù)使用。如需加水、應(yīng)把總閥調(diào)至“全排”，打開進(jìn)水閥加水后繼續(xù)操作。

8、保養(yǎng)：每次滅菌完畢后，關(guān)閉電源，停止加熱，隨后將總閥調(diào)至“全排”，排出套層內(nèi)的蒸汽。開啟鉑門少許，散發(fā)剩余蒸汽，使消毒室內(nèi)壁經(jīng)常保持干燥，同時(shí)排除蒸汽發(fā)生器內(nèi)的余水。